IgG FcRn介导奶牛乳房炎无乳链球菌和金黄色葡萄球菌保护性抗原亚单位疫苗的研究

发布时间：2024-02-19 21:55

　　新生儿的Fc受体(FcRn)对于向胎儿和新生儿提供具有保护性的母源抗体具有至关重要的作用,同时具有促进局部保护性免疫的功能。FcRn还可以将特异性IgG与抗原结合的抗原-抗体复合物转运到粘膜的固有层,抗原复合物通过抗原递呈细胞递呈给T淋巴细胞,引起机体的免疫反应。为探究由IgG FcRn介导奶牛乳房炎无乳链球菌和金黄色葡萄球菌保护性抗原亚单位疫苗的免疫效果,验证IgG FcRn在奶牛乳腺发挥局部免疫过程中的重要作用。本研究采用分子生物学技术,构建了牛IgG Fc和无乳链球菌(S.agalactiae)重要的表面抗原Sip的重组质粒pET-22b-Fc-Sip,通过原核表达并配合佐剂制备了亚单位疫苗Fc-Sip。在本实验室过去研究的基础上,制备了金黄色葡萄球菌Fc-FnBPB-ClfA亚单位疫苗。将无乳链球菌Fc-Sip亚单位疫苗、金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)Fc-FnBPB-ClfA亚单位疫苗、Fc-Sip和Fc-FnBPB-ClfA二联亚单位疫苗对即将干奶的患有隐性乳房炎奶牛进行免疫试验。通过免疫前后乳样细菌分离、乳样体细胞数测定、免疫血清间接ELIS...

【文章页数】：49 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图1pET-22b(+)载体图谱

PCR反应体系加入量（μL）PCRreactionsystemAmountofaddition(μL)Fcrubberrecoveryproduct2Siprubberrecoveryproduct25×PCRBuffer10dNTPMixt....

图2PCR鉴定结果和双酶切结果

图2PCR鉴定结果和双酶切结果Fig2PCRidentificationresultsanddoubleenzymecuttingresults1：Fc片段；2：Sip片段3：Fc-Sip融合片段4：pET-22b-Sip双酶切结果DNAM....

图3pET-22b-Fc-Sip质粒测序结果

图3pET-22b-Fc-Sip质粒测序结果Fig3TheresultofpET-22b-Fc-Sippasmidsequence2.3.3目的蛋白Fc-Sip最佳诱导浓度的确定结果每支离心管中菌液的接种比例、菌液的体积、菌液的诱导温度和转速均是相同各管....

图4重组蛋白Fc-Sip不同浓度梯度IPTG诱导电泳图

图4重组蛋白Fc-Sip不同浓度梯度IPTG诱导电泳图Fig4IPTGgradientofFc-SipusProteinMarker1：pET-22b（BL21）inducedwithIPTG2-8：Expressionproductsind....

本文编号：3903377