不同浓度重组鸡白细胞介素-6（rChIL-6）蛋白在鸡体内外活性研究

发布时间：2024-02-26 03:03

　　为了研究重组鸡白细胞介素-6(rChIL-6)蛋白在SPF鸡体内外活性相关性，从而为开发以rChIL-6蛋白为主要成分的基因工程免疫增强剂研究提供科学依据，本研究采用间接ELISA法和MTS法分别测定不同浓度的rChIL-6蛋白与抗rChIL-6单抗发生特异性免疫反应活性以及体外促鸡脾脏、外周血T淋巴细胞增殖活性；筛选出4个浓度的rChIL-6蛋白进行体内活性比较实验。将160只37日龄SPF鸡随机平均分为20组，进行以上4个浓度的rChIL-6蛋白对传染性法氏囊病毒(IBDV)灭活疫苗、活疫苗免疫增强实验研究；通过检测分析接种后不同时间实验组鸡的IBDV抗体水平、不同细胞因子(ChIL-2、ChIL-4、ChIL-6、ChIFN-α、ChIFN-γ)表达水平、脾脏和外周血T淋巴细胞增殖活性、外周血T淋巴细胞亚群含量等指标，筛选出可在鸡体内发挥好的免疫增强作用的rChIL-6蛋白最大稀释度。将48只130日龄SPF鸡随机平均分为6组，进一步实验通过皮下注射、滴鼻点眼途径将rChIL-6蛋白(以上实验筛选出的浓度，1:25倍稀释)与新城疫病毒(NDV)灭活疫苗、弱毒活疫苗同时接种后不同时...

【文章页数】：79 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
ABSTRACT
第1章 文献综述
    1.1 白细胞介素-6(IL-6)简介
    1.2 IL-6的受体
    1.3 IL-6的生物学作用
    1.4 人白细胞介素-6的研究进展
        1.4.1 人白细胞介素-6的结构
        1.4.2 人白细胞介素-6(HuIL-6)的基因结构
        1.4.3 人白细胞介素-6的功能及其在临床的应用
    1.5 鸡白细胞介素-6(ChIL-6)的研究进展
        1.5.1 鸡白细胞介素-6(ChIL-6)的结构及生物活性检测
        1.5.2 鸡白细胞介素-6在临床上的应用前景
第2章 不同浓度的重组鸡白细胞介素-6(rChIL-6)蛋白体外活性研究
    2.1 材料
        2.1.1 实验动物
        2.1.2 主要试剂
        2.1.3 主要仪器设备
    2.2 方法
        2.2.1 rChIL-6蛋白与抗ChIL-6单抗发生特异性免疫反应活性检测
        2.2.2 rChIL-6蛋白促鸡脾淋巴细胞增殖活性检测
        2.2.3 rChIL-6蛋白促鸡外周血T淋巴细胞增殖活性检测
    2.3 结果
        2.3.1 rChIL-6蛋白与抗ChIL-6单抗发生特异性免疫反应的活性
        2.3.2 rChIL-6蛋白促鸡脾淋巴细胞增殖活性
        2.3.3 rChIL-6蛋白促鸡外周血T淋巴细胞(PBLC)增殖活性
    2.4 讨论
    2.5 小结
第3章 不同浓度rChIL-6蛋白对传染性法氏囊病毒(IBDV)灭活疫苗免疫增强作用比较研究
    3.1 材料
        3.1.1 实验动物及饲养
        3.1.2 主要试剂
        3.1.3 主要仪器设备
    3.2 方法
        3.2.1 试验鸡分组及接种方法
        3.2.2 样品的采集
        3.2.3 IBDV抗体检测
        3.2.4 不同细胞因子表达水平检测
        3.2.5 鸡脾脏淋巴细胞增殖活性检测
        3.2.6 鸡外周血T淋巴细胞增殖活性检测
        3.2.7 鸡外周血淋巴细胞CD4⁺/CD8⁺比值测定
    3.3 结果
        3.3.1 IBDV抗体水平
        3.3.2 不同细胞因子表达水平
        3.3.3 鸡脾脏淋巴细胞增殖活性
        3.3.4 鸡外周血T淋巴细胞增殖活性
        3.3.5 外周血淋巴细胞CD4⁺/CD8⁺比值
    3.4 讨论
    3.5 小结
第4章 重组鸡白细胞介素-6(rChIL-6)蛋白对IBDV活疫苗免疫增强作用比较研究
    4.1 材料
        4.1.1 实验动物
        4.1.2 主要试剂
        4.1.3 主要仪器设备
    4.2 方法
        4.2.1 试验分组免疫接种方法
        4.2.2 样品的采集
        4.2.3 IBDV抗体检测
        4.2.4 不同细胞因子表达水平检测
        4.2.5 鸡脾脏淋巴细胞增殖活性检测
        4.2.6 鸡外周血T淋巴细胞增殖活性检测
        4.2.7 鸡外周血淋巴细胞CD4⁺/CD8⁺比值测定
    4.3 结果
        4.3.1 IBDV抗体水平
        4.3.2 细胞因子表达水平
        4.3.3 鸡脾淋巴细胞增殖活性
        4.3.4 鸡外周血T淋巴细胞增殖活性
        4.3.5 鸡外周血T淋巴细胞亚群CD4⁺/CD8⁺比值
    4.4 讨论
    4.5 小结
第5章 重组鸡白细胞介素-6蛋白对新城疫活疫苗及灭活疫苗的免疫增强作用研究
    5.1 材料
        5.1.1 实验动物
        5.1.2 主要试剂
        5.1.3 主要仪器设备
    5.2 方法
        5.2.1 试验动物分组及免疫接种方法
        5.2.2 样品采集
        5.2.3 NDV抗体滴度测定
        5.2.4 鸡脾脏淋巴细胞增殖活性检测
        5.2.5 鸡外周血T淋巴细胞增殖活性检测
    5.3 结果
        5.3.1 NDV抗体滴度
        5.3.2 鸡脾淋巴细胞增殖活性
        5.3.3 鸡外周血T淋巴细胞增殖活性
    5.4 讨论
    5.5 小结
第6章 结论
参考文献
缩略语词汇表
致谢
攻读硕士学位期间的研究成果
    一、攻读硕士学位期间发表的与学位论文相关的学术论文及专著



本文编号：3911234