恒河猴幼猴B病毒动态监测和BV-gD真核表达与应用研究

发布时间：2024-03-08 21:15

　　猴B病毒(Cercopithecine herpesvirus1, Herpesvirus simiae, monkey B virus; BV),属于α-疱疹病毒,主要存在于亚洲尤其是印度系猕猴属(如恒河猴和食蟹猴等)动物中,是一种严重危害人类健康的动物源性病原体,属于第一类病原微生物。在自然宿主猕猴中的感染率相当高,多呈潜伏感染,常见口、生殖器疱疹或呈无症状感染,类似于人单纯疱疹病毒Ⅰ型(Herpes simple virus, HSV Ⅰ)和Ⅱ型(HSV Ⅱ)感染患者的临床表现。病毒可长期潜伏在机体的三叉神经节和腰骶神经节,不定期活化,通过唾液或生殖道向外排毒。猕猴之间的病毒一般通过交配、咬伤或者抓伤等方式传播,母猴垂直传播给仔猴几率极低。人感染后则会导致脑炎、脑脊髓炎,严重的呼吸麻痹死亡,在未及时得到药物治疗的情况下病死率超过70%,幸存者会留下神经后遗症。猴B病毒的疫苗类制剂尚未成型且无有效的抗病毒药物,快速检测和早期诊断是防止病毒危害的主要措施之一。 B病毒的检测方法主要包括病原分离、分子生物学及血清学检测法。病毒分离是标准的检测方法,但由于B病毒操作的危险性、分离培养耗时...

【文章页数】：53 页

【学位级别】：硕士

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中文摘要
Abstract
第一章 文献综述
    1 B病毒的分子生物学特征
    2 B病毒的感染
        2.1 自然宿主BV感染
        2.2 人BV感染
    3 B病毒的检测
        3.1 病毒分离培养
        3.2 分子生物学方法
        3.3 血清学检测方法
    4 BV疾病的预防和治疗
    5 SPF猴群的建立和维护
第二章 恒河猴离乳幼猴B病毒动态监测
    1 实验材料
        1.1 动物及血清
        1.2 仪器设备
        1.3 试剂
    2 实验方法
        2.1 酶联免疫吸附法(ELISA)
        2.2 数据统计分析
    3 实验结果
        3.1 A组15只群养恒河猴幼猴
        3.2 B组(B1和B2)39只群养恒河猴幼猴
    4 分析与讨论
第三章 猴B病毒囊膜糖蛋白gD 293T细胞中的表达及应用的研究
    1 实验材料
        1.1 动物
        1.2 细胞和载体
        1.3 仪器设备
        1.4 试剂
    2 实验方法
        2.1 真核表达载体pcDNA3.1-6×his-gD的构建
        2.2 重组质粒提取
        2.3 pcDNA3.1-6×his-gD双酶切鉴定
        2.4 293t细胞的培养及传代
        2.5 转染293t细胞
        2.6 gD蛋白质的纯化
        2.7 SDS-PAGE和western blot检测
        2.8 gD浓度测定及恒河猴免疫
    3 实验结果
        3.1 重组质粒pcDNA3.1-6×his-gD的双酶切鉴定及测序
        3.2 gD蛋白在293T细胞中的表达及纯化
        3.3 免疫动物血清抗体效价的ELISA检测
    4 分析与讨论
    5 总结
缩略词
参考文献
致谢



本文编号：3922401