猪源生物膜乳酸菌的筛选与生物学特性分析

发布时间：2024-03-20 18:56

　　为了筛选能够用于养猪生产中的潜在益生乳酸菌,试验从健康猪粪便中筛选出乳酸菌,并采用16S rDNA分子生物学方法进行鉴定,然后进一步对该菌株进行体外生物学特性分析和小鼠致病性试验。结果表明:从猪粪便中共分离出3株疑似乳酸菌菌株,而后从3株疑似乳酸菌菌株中成功筛选出1株具有抗菌活性和生物被膜形成能力的乳酸菌,命名为L-18,并确定乳酸菌L-18株为约氏乳杆菌(Lactobacillus johnsonii)。L-18株乳酸菌具有产酸能力,能够耐受50℃和60℃、pH值2.0～10.0以及1%胰蛋白酶环境;对猪小肠上皮细胞的黏附率为77.04%,与鼠李糖乳杆菌ATCC53103相比差异显著(P<0.05);在MRS液体培养基中培养大约4 h后进入对数生长期,并持续生长8 h后进入稳定期;对青霉素等8种药物高度敏感,对头孢他定等6种药物中度敏感,对庆大霉素等6种药物表现出耐药;小鼠致病性试验表明L-18株乳酸菌具有安全性,无毒性。说明L-18株乳酸菌具有益生菌的典型特性和功能,可用于开发和利用。

【文章页数】：8 页

【部分图文】：

图2分离株生物被膜形成能力测定结果

结果见图2。由图2可见,分离株L-18的OD590值极显著大于阴性对照,而分离株L-51、L-38的OD590值与阴性对照相比差异不显著(P>0.05),表明分离株L-18的生物被膜形成能力更强,而分离株L-51、L-38的生物被膜形成能力较弱。

图3分离株16SrDNA序列扩增检测结果

结果见图3和图4。由图3可见,以L-18株乳酸菌基因组DNA为模板,利用16SrDNA通用引物进行PCR扩增,结果在1500bp左右出现目的条带。

图4L-18株乳酸菌系统发育树

将测序获得的PCR产物序列(GenBank:MN252101)经BLAST比对发现,与纳氏乳杆菌(Lactobacillusjohnsonii)具有100%的同源性;利用Mega6.0软件,采用邻接法构建系统发育树(见图4),鉴定分离株L-18为约氏乳杆菌(Lactobac....

图5L-18株乳酸菌产酸试验结果

结果见图5。由图5可见,阴性对照MRS肉汤初始pH值为6.76±0.06,培养48h后,L-18乳酸菌上清液的pH值为4.29±0.01,可见L-18乳酸菌上清液呈酸性,表明L-18乳酸菌具备产酸能力,与阴性对照相比差异极显著(P<0.01)。

本文编号：3933149