猪星状病毒分离鉴定及其全基因组序列分析和衣壳蛋白原核表达

发布时间：2024-03-30 13:22

　　星状病毒(Astrovirus, AstV)是一类可感染人及其他多种动物的肠道疾病相关病原。目前该病毒已经从人、猪、牛、蝙蝠、犬、猫等31种哺乳类动物和鸡、火鸡、鸭和鸽子等6种禽类中检测出来,然而星状病毒感染与动物肠道疾病之间的关系并没有得到深入的了解。基因变异性已在许多种动物星状病毒中发现,但是由此产生的抗原性差异仅在人星状病毒中得到证实。此外,越来越多的研究证据表明星状病毒之间可以发生基因重组。由此可知,星状病毒的多宿主性、基因差异性及其重组现象和跨种间传播及适应新宿主的能力,使得星状病毒成为潜在的新兴人畜共患病原。本研究旨在探究猪星状病毒的分离培养特性和分析其遗传变异规律和衣壳蛋白的抗原特性,从而为进一步加深对猪星状病毒的了解而提供一定的理论支持和实践依据。 本研究采用RT-PCR检测为猪星状病毒阳性的猪粪便上清进行病毒分离；在添加胰酶的条件下,分离得到1株能在PK-15细胞上稳定增殖20代同时产生明显细胞病变(CPE)的猪星状病毒(PAstV-GX1)毒株,病毒的TCID50为10622/ml。然而在不添加胰酶条件下,病毒的致细胞病变能力显著降低。通过采用常规PCR,3’RAC...

【文章页数】：103 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图1-3星状病毒基因组结构[32IFig1-3GenomestructureofAstroviruses^"^^'

星状病毒基因组为单股TF.链RNA,虽然星状病毒科各成员的基因组长度不一(6.17kb?7.72kb),但是其结构基本相同（图1-3)。病毒基因组包念5'和3'端非编码区C5'UTR,3'UTR)和ORFla,ORFlb，0RF2三个幵放性阅读框（ORFs)；病毐基因组3'末端还....

图1-4星状病毒非结构蛋内及推测的蛋白基因组结构基序【-)21(▲:细胞内蛋白醜，A：病逛合成蛋白晦，I::::、、推测的病毒蛋白酶酶切位点）

p55065图1-4星状病毒非结构蛋内及推测的蛋白基因组结构基序【-)21(▲:细胞内蛋白醜，A：病逛合成蛋白晦，I::::、、推测的病毒蛋白酶酶切位点）Fig1-4Nunstructuralproteinsandproteinstructuremotifs....

图1-4.星状病毒结构蛋白特征[32](A：半胱天冬酶酶切位点，A:胰酶酶切位点，A：推测的胰酶酶切位点）

图1-4.星状病毒结构蛋白特征[32](A：半胱天冬酶酶切位点，A:胰酶酶切位点，A：推测的胰酶酶切位点）Fig1-4.Featuresofstructuralproteins[32](Axaspasecleavagesites,A:trypsincleava....

图2-1病毒IFA鉴定试验方案

作为IFA试验的一抗。为减少试验过程中存在非特异性结合的可能性，在IFA试验操作过程中需做病毒阴性对照、血清阴性对照。具体试验方案如图2-1所示：((1:5。)人(1:5。)人(1:5。)I■■PAstV.nfectedMockinfectedf90 PBS iir\....

本文编号：3942418