AMPK激活剂在绵羊精液冷冻保存中的作用研究

发布时间：2024-04-07 23:37

　　旨在研究AMPK激活剂二甲双胍(metformin,Met)和阿卡地新(acadesine,AICAR)对绵羊精液冷冻保存效果的影响。本研究首先在冷冻基础稀释液中分别添加不同浓度(0、100、200、300、400、500μmol·L^-1)的Met和AICAR,冷冻解冻后根据精子活力、运动性能和结构完整性指标筛选出最佳的添加浓度(400μmol·L^-1 Met、200μmol·L^-1 AICAR);然后分别使用不同的冷冻稀释液(对照组:稀释液;Met组:含400μmol·L^-1 Met的稀释液;AICAR组:含200μmol·L^-1 AICAR的稀释液)冷冻精液,解冻后检测精子中AMPK蛋白表达、顶体酶活性、代谢指标、线粒体功能以及抗氧化酶活性。结果表明,稀释液中添加400μmol·L^-1 Met和200μmol·L^-1AICAR均可显著提高解冻后精子活力、运动性能及精子结构完整性(P<0.05),其中400μmol·L

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【部分图文】：

图1精液冷冻保存试验技术路线图

将采集后的精液置于恒温箱中(37℃)带回实验室,立即进行处理。精液冷冻保存试验技术路线见图1。1.2.2精液品质相关指标的检测

图2显微镜观察精子顶体完整性和质膜完整性

通过向精液冷冻稀释液中添加终浓度为0、100、200、300、400、500μmol·L-1Met或AICAR来探究AMPK激活剂对冷冻精液解冻后精子结构完整性的影响,显微镜下观察精子,如图2A所示,黄色箭头所指为顶体完整精子,背景为浅蓝色,核为深蓝色;红色箭头所指为顶体不完....

图3AMPK及p-AMPK在绵羊精子上的表达定位

顶体反应对于精卵融合以及受精过程至关重要,完整的精子结构是精卵结合的重要前提,也是卵子成功受精的必要条件[11],所以精子的顶体完整率和质膜完整性成为检测精液品质的重要指标。研究表明,冷冻解冻后,80%绵羊精子发生质膜肿胀并且还会发生顶体外膜肿胀,导致内容物外泄。精子头部的顶体由....

图4AMPK激活剂对冷冻保存后精子中AMPK和p-AMPK蛋白表达的影响

精子头部的顶体由细胞核周围的高尔基体同源性膜形成,含有多种与精卵结合相关的水解酶,其中,顶体酶是一种特殊的丝氨酸蛋白水解酶,主要参与调控顶体中其他酶的释放[15]。大部分的顶体酶分布于顶体内膜和赤道膜上,而精子的冷冻保存处理会使顶体膜受到结构和功能的损伤,因此,不可避免地会造成顶....

本文编号：3948152