细胞自噬在猪细小病毒复制过程中的作用

发布时间：2024-04-13 20:38

　　猪细小病毒(porcine parvovirus,PPV)属于细小病毒科、细小病毒属成员,是引起母猪繁殖障碍性疾病的主要病原之一。PPV一般在猪源性生长分裂旺盛的细胞中进行增殖,感染PPV的细胞会产生明显的细胞病变效应(cytopathic effect,CPE)。细胞自噬作为细胞中维持稳态的重要方式,在病毒致病过程中发挥了重要作用。虽然关于细胞自噬与病毒间的相互作用机制研究已有很多报道,但细胞自噬如何调控PPV的复制,至今尚不清楚。本研究以PK-15细胞作为模式细胞,用PPV感染PK-15细胞和GFP-LC3质粒转染的PK-15细胞,western blotting检测细胞自噬相关蛋白的表达变化,在荧光显微镜下观测自噬体的形成。以PPV感染PK-15细胞、利用自噬诱导剂建立的PK-15细胞自噬模型、利用siRNA技术干扰自噬关键基因atg5的PK-15细胞,western blotting检测细胞自噬相关蛋白的表达、PPV VP2的表达,Real-time Q-PCR检测PPV的拷贝数和PPV VP2的mRNA水平。研究取得以下结果。1.以0 MOI、0.25 MOI、0.50 MO...

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【部分图文】：

图1-1氨基酸缺乏时ULK激酶激活III型磷脂酰肌醇3激酶复合物Fig1-1ULKkinasesactivatetheclassIIIPI(3)Kinautophagyfollowingaminoacidstarvation.(Nazarkoetal.2013)

图1-1氨基酸缺乏时ULK激酶激活III型磷脂酰肌醇3激酶复合物Fig1-1ULKkinasesactivatetheclassIIIPI(3)Kinautophagyfollowingaminoacidstarvation.(Naza....

图2-1PPV感染PK-15细胞后出现CPE现象（40×）

图2-1PPV感染PK-15细胞后出现CPE现象（40×）A:PK-15细胞；B:PPV感染24h；C:PPV感染48hFig.2-1TheCPEphenomenonafterPPVinfectedPK-15cellsA:PK-....

图2-2PPVNS1基因的PCR扩增结果

V感染PK-15细胞后出现CPE现象（45细胞；B:PPV感染24h；C:PPV感染CPEphenomenonafterPPVinfectedPK-ls;B:PPVinfectedfor24h;C:PPVinfecte力鉴定DN....

图2-3不同MOIPPV感染后细胞自噬相关蛋白表达检测Fig.2-3Expressionofautophagy-associatedproteinafterPPVinfectedwithdifferentMOI.

分数）gTCID50=距离比例×稀释对数之间的差+高于50%病变的稀释度对数据上述公式，计算得到PPV的TCID50值为：TCID50=10-6.194/0.1mL。：将PPV稀释106.194倍后感染100μL可使50%细胞发生病变。不同MOIPPV....

本文编号：3953593