小檗碱对川崎病冠状动脉内皮细胞作用的实验研究

发布时间：2024-03-03 11:26

　　目的:本研究旨在探讨川崎病(KD)血清诱导对人冠状动脉内皮细胞(HCAECs)的损伤作用与可能机制,以及小檗碱(BBR)的保护作用与可能机制。方法:KD急性期患儿20例,正常同年龄范围对照组20例,KD患儿于入院治疗时直接取血备检。1、分别用健康儿童、KD患者血清标本孵育人冠状动脉内皮细胞并分组,用小檗碱(BBR)提取液分别加入两组细胞标本进行培养并分组;2、用流式细胞技术分别检测细胞周期(G0,G1,G2,S)比例、凋亡细胞比例;3、用Western blotting检测内皮细胞损伤标志物(THBD、VWF、EDNI)变化;4、用iTRAQ试剂标记及RPLC-MS分析法质谱检测每组中差异表达的蛋白质;5、用Cytoscape plug-in ClueGO和ReactomeFIViz软件检索差异表达蛋白的相关信息;6、用Western blotting验证KD组、健康儿童组血清培育HCAECs在BBR处理前后差异表达的蛋白质(ATF4、eIF-2α和p-eIF-2α;HSP90B1、DNAJC3、HSPG2、P4HB、VCP和HSPA5)。结果:1、流式细胞技术分析细胞凋亡结果示:加入...

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【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图1.小檗碱对KD诱导的内皮细胞凋亡的影响

25图1.小檗碱对KD诱导的内皮细胞凋亡的影响A.用流式细胞仪检测正常细胞组或KD组以及两组分别在小檗碱处理前后(20μ的细胞凋亡变化.B.用平均数±标准差(*P<0.05,**P<0.01,n=3)表示各组样本的凋亡细胞变化

图2.小檗碱对KD患儿人冠状动脉内皮细胞细胞增殖的影响

27图2.小檗碱对KD患儿人冠状动脉内皮细胞细胞增殖的影响A.流式细胞结果显示小檗碱在G0/G1期抑制细胞增殖B.用平均数±标准差(*P<0.05,**P<0.01,n=3)表示不同诱导条件下不同细胞周期细胞增殖变化

图3.小檗碱对KD患儿血清诱导后细胞内THBD，VWF和END1表达水平的影响

遵义医科大学硕士学位论文陈晓舟2.3BR能修复KD组的细胞损伤为了探讨BBR能否修复川崎病患儿血清诱导的冠状动脉内皮细胞损伤，使用westernblot方式检测KD组在加入BBR前后血管内皮细胞损伤标记物（THBD、VWF、EDNI）的表达变化（见图....

图4.KD组样本在小檗碱处理前后差异表达的蛋白的相互关系图

30图4.KD组样本在小檗碱处理前后差异表达的蛋白的相互关系图。这个关系图基于KEGG通路相关蛋白的功能，而且临界值为P<0.05。A.KD组在小檗碱处理前差异表达蛋白的相关关系图B.KD组在小檗碱处理后差异表达蛋白的相关关系图

本文编号：3917715