内皮素-1对高氧暴露早产鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞的影响及其机制研究

发布时间：2024-03-08 02:02

　　第一部分早产鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞分离、纯化及原代培养 目的 探讨早产鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞(AECⅡ)的分离、纯化和培养的方法,为研究内皮素-1(ET-1)干预对高氧暴露AECⅡ的影响及其作用机制提供细胞模型。 方法 水合氯醛麻醉孕19天Sprague-Dawley(SD)大鼠,剖宫产取出胎鼠,分离肺组织,采用胰酶结合胶原酶的方法消化肺组织细胞,制成细胞悬液,用差速离心和反复贴壁的方法纯化AECⅡ,用含10%胎牛血清的DMEM/F12培养基培养细胞。台盼蓝染色检测细胞活力,改良巴氏染色检测细胞纯度,透射电镜鉴定细胞,倒置相差显微镜观察细胞生长情况。 结果 每只孕鼠可获得19天胎龄的早产鼠数量为8¹1只(95% CI),每只早产鼠可获得AECⅡ细胞数为(7.7±0.9)×10⁶,细胞的活力为(95.5±1.6)%,纯度为(95.0±1.5)%。透射电镜观察细胞表面有短小的微绒毛,胞质内有特征性的板层小体。倒置相差显微镜下观察AECⅡ原代培养12¹8h左右已经贴壁生长,培养24⁴8h细胞处于对数生长期,72h...

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图1台盼蓝染色(×100)

内皮素-1对高氧暴露早产鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞的影响及其机制研究

图1各组AECⅡ形态学变化（×100）

2实验结果2.1高氧暴露24小时及ET-1干预后AECⅡ的形态学变化倒置相差显微镜观察显示，空气组细胞呈圆形或立方形，紧贴于瓶底，细胞之间连接紧密，细胞质内颗粒较多(图1A)；高氧组AECⅡ细胞皱缩，胞内颗粒数目减少，间隙增大，生长不良(图1B)；高氧+ET-....

本文编号：3921842