基于iTRAQ技术分析脾虚痰浊动脉粥样硬化巴马猪小肠蛋白质组学变化

发布时间：2023-03-21 11:53

　　目的应用iTRAQ技术研究脾虚痰浊动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)巴马猪小肠蛋白质组学变化,在蛋白质水平上探讨脾虚痰浊AS猪小肠功能改变机制。方法 10只健康半岁雄性广西巴马小型猪,随机分为正常对照组和脾虚痰浊AS组,每组5只。正常对照组每日给予基础饲料喂饲。脾虚痰浊AS模型组采用中医经典复合因素造模法,即饮食不节加劳倦过度造脾虚模型,配合现代医学冠脉内皮损伤手术造动脉粥样硬化模型。分离提取小肠总蛋白,以iTRAQ试剂标记后进行质谱检测并以软件分析差异表达的蛋白质,分析与小肠消化吸收、细胞炎症反应、脂质代谢等有关系的代表通路。结果 iTRAQ技术分析发现:蛋白定量结果脾虚痰浊AS组与正常对照组相比,得到99个上调蛋白和47个下调蛋白,共计146个差异蛋白,具代表性蛋白8个,主要有胰脂肪酶相关蛋白2前体;MHCⅠ类抗原1-3前体;1-酰基-sn-甘油-3-磷酸酰基转移酶前体;钠/葡萄糖协同转运体1;ATP结合盒亚家族G成员2;纤维蛋白原链前体等。这些蛋白存在于3条代表性通路中,分别为甘油脂类代谢通路、胆汁酸分泌通路、细胞黏附分子通路等,这些蛋白参与的生物过程可能与脂类...

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【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 动物与分组
    1.2 试剂与仪器
    1.3 模型制备及分组
    1.4 指标检测及方法
        1.4.1 iTRAQ定量分析(华大基因完成)
            (1)蛋白质提取过程:
            (2)蛋白质浓度测量:
            (3)SDS凝胶电泳:
            (4)液质联用分析:
            (5)数据库查询及信息分析:
        1.4.2 统计学方法
2 结果
    2.1 蛋白定量分析
    2.2 差异蛋白通路分析
    2.3 差异蛋白功能分析
3 讨论



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