运动与黑果枸杞活性成分对NAFLD小鼠的干预作用研究

发布时间：2023-04-04 03:52

　　研究背景和研究目的非酒精性脂肪肝病(Nonalcoholic fatty liver disease,NAFLD)是指由组织学或影像学判定肝脏脂肪堆积(大于等于5%肝)并且不存有其他引起肝脏脂肪变性的因素:病毒性肝炎、大量饮酒、药物或遗传性疾病等的临床病理综合征,包括脂肪肝变性、脂肪性肝炎、肝硬化等一系列疾病进程。在脂肪肝变性阶段,肝细胞质中形成脂滴,导致细胞肿大,这一阶段是NAFLD的最早阶段,并呈可逆状态。肝脏中脂质堆积的主要影响因素包括:脂质的合成、脂肪酸氧化以及脂肪酸氧化过程中产生的氧化应激。随着现代生活方式的改变,NAFLD的发病率在全球范围内迅速增长,达到17%-33%,在我国NAFLD已经高居城市男性高发疾病首位,近年,NAFLD和NASH的发病率分别为46%和12%,非酒精性脂肪肝相关的肝硬化疾病呈上升趋势,而且大部分发生在中年人群中。而NAFLD的发病机制并未完全确定,并且在药理学上尚无共识治疗手段。生活方式的干预包括运动训练,是防治NAFLD的核心疗法。运动可降低NAFLD患者肝内脂质含量和肝细胞损伤标志物,这一保护机制包含多个方面:血脂和脂蛋白含量、胰岛素代谢、肝...

【文章页数】：134 页

【学位级别】：博士

【文章目录】：
摘要
ABSTRACT
1 前言
2 高糖高脂膳食诱导NAFLD动物模型的建立
    2.1 材料与方法
        2.1.1 实验对象
        2.1.2 主要试剂
        2.1.3 仪器与设备
        2.1.4 10%蔗糖溶液的制备
        2.1.5 动物模型构建
        2.1.6 样本收集及指标检测
    2.2 统计学分析
    2.3 实验结果
        2.3.1 一般结果
        2.3.2 高糖高脂诱导小鼠NAFLD模型血清相关指标的变化
        2.3.3 肝脏病理组织学观察结果
    2.4 讨论
3 运动与黑果枸杞有效成分对非酒精性脂肪肝病小鼠的干预效果
    3.1 材料与方法
        3.1.1 实验动物
        3.1.2 主要试剂
        3.1.3 仪器与设备
        3.1.4 黑果枸杞有效成分提取
        3.1.5 模式动物分组与给药
        3.1.6 运动方案
        3.1.7 技术路线
    3.2 样本收集与检测指标
        3.2.1 组织取材
        3.2.2 石蜡切片制备
        3.2.3 检测指标
    3.3 统计学分析
    3.4 实验结果
        3.4.1 一般结果
        3.4.2 有氧运动及黑果枸杞活性成分干预对高糖高脂膳食诱导NAFLD小鼠肝脏组织形态学改变的影响
        3.4.3 有氧运动及黑果枸杞活性成分干预对高糖高脂膳食诱导NAFLD小鼠肝脏脂质蓄积的影响
        3.4.4 有氧运动及黑果枸杞活成分对 NAFLD 小鼠血清转氨酶的影响
        3.4.5 有氧运动及黑果枸杞活性成分对NAFLD小鼠血脂的影响
        3.4.6 有氧运动及黑果枸杞活性成分对NAFLD小鼠肝脏氧化损伤的保护作用
    3.5 讨论
4 有氧运动与黑果枸杞活性成分质对NAFLD小鼠脂质合成信号通路的干预作用研究
    4.1 材料与方法
        4.1.1 实验动物
        4.1.2 主要试剂
        4.1.3 仪器与设备
        4.1.4 模式动物分组与给药
        4.1.5 运动方案
    4.2 样本收集与检测指标
        4.2.1 组织取材
        4.2.2 石蜡切片制备
        4.2.3 免疫组织化学染色
        4.2.4 小鼠肝脏总RNA提取
        4.2.5 反转录
        4.2.6 Real-Time PCR反应
    4.3 数据分析
    4.4 实验结果
        4.4.1 有氧运动及黑果枸杞活性成分对NAFLD小鼠肝脏脂质合成相关基因m RNA表达的影响
        4.4.2 有氧运动及黑果活性成分对NAFLD小鼠肝脏脂质合成相关因子蛋白表达的影响
    4.5 讨论
        4.5.1 有氧运动、黑果枸杞活性成分对NAFLD小鼠脂质合成代谢相关酶的影响
        4.5.2 有氧运动、黑果枸杞活性成分对NAFLD小鼠脂质合成代谢相关转录因子的影响
5 有氧运动与黑果枸杞活性成分质对NAFLD模型小鼠脂肪酸氧化的干预作用研究
    5.1 实验研究
        5.1.1 实验动物
        5.1.2 主要试剂
        5.1.3 仪器与设备
        5.1.4 黑果枸杞有效成分提取
        5.1.5 模式动物分组与给药
        5.1.6 运动方案
    5.2 样本收集与检测指标
        5.2.1 组织取材
        5.2.2 石蜡切片制备
        5.2.3 免疫组织化学染色
        5.2.4 小鼠肝脏总RNA提取
        5.2.5 反转录
        5.2.6 检测指标
    5.3 统计分析
    5.4 实验结果
        5.4.1 一般结果
        5.4.2 有氧运动及黑果枸杞活性成分对NAFLD小鼠肝脏脂肪酸氧化相关因子m RNA表达的影响
        5.4.3 有氧运动及黑果枸杞活性成分对NAFLD小鼠肝脏脂肪酸氧化相关因子蛋白表达的影响
        5.4.4 有氧运动及黑果枸杞活性成分对NAFLD小鼠肝脏线粒体β氧化速率的影响
    5.5 讨论
6 有氧运动通过H2S调控SREBP-1c信号通路干预NAFLD小鼠肝脏脂质合成
    6.1 材料与方法
        6.1.1 主要试剂
        6.1.2 仪器与设备
        6.1.3 实验动物
        6.1.4 模式动物分组与给药
        6.1.5 运动方案
    6.2 样本收集与检测指标
        6.2.1 组织取材
        6.2.2 小鼠肝脏总RNA提取
        6.2.3 反转录
        6.2.4 检测指标
    6.3 统计学分析
    6.4 实验结果
        6.4.1 CSE基因mRNA表达量检测结果
        6.4.2 CBS基因mRNA表达量检测结果
        6.4.3 有氧运动及CSE基因抑制剂、外源性NASH添加对NAFLD小鼠体重、肝湿重、肝指数及肝脏脂质含量的影响
        6.4.4 有氧运动及CSE基因抑制剂、外源性NASH添加对NAFLD小鼠肝脏组织形态学改变的影响
        6.4.5 有氧运动及CSE基因抑制剂、外源性NASH添加对NAFLD小鼠肝脏及外周血中H2S含量的影响
        6.4.6 有氧运动及CSE基因抑制剂、外源性NASH添加对NAFLD小鼠肝脏SREBP-1c基因、蛋白阳性表达水平及其靶基因FAS、ACC、
        SCD1 基因表达的影响
    6.5 讨论
        6.5.1 有氧运动及CSE基因抑制剂、外源性NASH添加对NAFLD小鼠肝脏脂质蓄积的影响
        6.5.2 有氧运动参与调控NAFLD小鼠肝脏H2S水平
        6.5.3 有氧运动通过调控SREBP-1c信号通路改善NAFLD小鼠肝脏脂质蓄积
7 结论
参考文献
综述
    参考文献
缩略词表
科研情况
致谢



本文编号：3781731