小鼠乳腺癌髓源抑制性细胞对B细胞功能的影响

发布时间：2023-05-13 14:57

　　目的:髓源抑制性细胞(myeloid-derived suppressor cell,MDSC)对多种免疫细胞如T细胞、NK细胞等的作用已有明确报道,但关于MDSC对B细胞的影响及机制尚未阐明。因此,探讨荷乳腺癌小鼠MDSC对B细胞功能的影响可有助于更全面地认识MDSC对免疫应答多细胞网络的负向调控功能,并使研究者对B细胞的免疫抑制有了更深刻的理解,为探索肿瘤、自身免疫耐受和自身免疫性疾病等的发生发展机制及免疫治疗的应用提供了新的研究途径。方法:构建BALB/c小鼠4T1乳腺癌模型,磁珠分选出肿瘤小鼠脾脏的MDSC与正常小鼠脾脏的B细胞,将MDSC与B细胞共孵育;流式细胞术检测MDSC对B细胞表面分子PD-1、PD-L1、CTLA-4、CCR6、CD62L和MHCⅡ的表达影响;ELISA法检测B细胞分泌的IgA、IgM和IgG的变化;BrdU试剂盒检测B细胞增殖情况;AnnexinⅤ/PI凋亡试剂盒检测B细胞凋亡。磁珠分选出共孵育体系中的B细胞,将其与T细胞共孵育,BrdU试剂盒检测T细胞增殖情况,AnnexinⅤ/PI凋亡试剂盒检测T细胞凋亡,流式细胞术检测T细胞分泌IFN-γ的情况...

【文章页数】：63 页

【学位级别】：硕士

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中文摘要
Abstract
缩略语/符号说明
前言
    研究现状、成果
    研究目的、方法
1 对象和方法
    1.1 研究材料
        1.1.1 研究试剂
        1.1.2 研究仪器
    1.2 实验方法
        1.2.1 试剂配制
        1.2.2 细胞培养
        1.2.3 构建4T1乳腺癌荷瘤小鼠模型
        1.2.4 磁珠分选小鼠脾脏细胞
        1.2.5 流式分选小鼠脾脏B细胞不同子集
        1.2.6 体外共培养
        1.2.7 流式细胞术检测MDSC对 B细胞表面分子表达的影响
        1.2.8 ELISA法检测MDSC对 B细胞分泌的细胞因子的影响
        1.2.9 BrdU掺入法检测B细胞、T细胞增殖
        1.2.10 流式细胞术检测B细胞、T细胞凋亡
        1.2.11 免疫组化评估荷瘤小鼠脾脏中MDSC和 B细胞的分布
        1.2.12 流式细胞术检测T细胞分泌的IFN-γ
        1.2.13 统计学处理
2 结果
    2.1 成功构建BALB/c小鼠4T1 乳腺癌模型
    2.2 MDSC对B细胞表型的调控
    2.3 MDSC对B细胞分泌抗体的调控
    2.4 MDSC促进B细胞的增殖,抑制B细胞的凋亡
    2.5 与MDSC共培养后的B细胞可以抑制T细胞增殖和IFN-γ的分泌
    2.6 与MDSC共培养后PD-1^-PD-L1⁺B细胞亚群比例增高
    2.7 PD-1^-PD-L1⁺B细胞具有免疫调节特性
    2.8 PD-1^-PD-L1⁺B细胞在骨髓、外周血、脾脏、淋巴结和肿瘤组织中的分布情况
    2.9 乳腺癌患者外周血中PD-1^-PD-L1⁺B 细胞明显扩增
3 讨论
    3.1 MDSC对B细胞正常免疫功能的调控
    3.2 MDSC调控B细胞的负性免疫调节功能
    3.3 MDSC诱导一群新的具有较强免疫抑制功能的PD-1^-PD-L1⁺B 细胞…
    3.4 小结
结论
参考文献
发表论文和参加科研情况说明
综述 调节性B细胞在乳腺癌中的研究进展
    综述参考文献
致谢
个人简历



本文编号：3816047