组蛋白去乙酰化酶3对恒定型自然杀伤性T细胞发育和功能的调控作用

发布时间：2023-10-30 17:58

　　目的:探讨组蛋白去乙酰化酶3 (HDAC3)缺失对恒定型自然杀伤性T细胞(iNKT)数量、发育表型和细胞因子产生功能的影响,确定HDAC3在iNKT细胞发育和功能发挥中的调控作用。方法:采用T细胞特异的hdac3基因敲除(HDAC3KO)及其野生型正常对照(WT)小鼠,每种小鼠各取3～5只,分离小鼠胸腺、脾脏、淋巴结和肝脏淋巴细胞,采用细胞表面抗体染色和流式细胞术检测HDAC3对iNKT细胞数量和发育表型的变化,实验至少重复3次。采用HDAC3KO小鼠及其同系B6.SJL小鼠,每种小鼠各取4～6只;提取以上2种小鼠骨髓细胞,混合后经尾静脉注入经γ射线照射的B6.SJL小鼠,以制备骨髓混合嵌合体模型,8周后流式细胞术检测不同骨髓来源iNKT细胞在胸腺的产生和发育,实验重复3次。选取HDAC3KO和WT小鼠,每种各取小鼠3～5只;采用iNKT细胞特异激活剂半乳糖神经酰胺腹腔注射4h后,收集各组小鼠脾脏淋巴细胞和血清,分别采用细胞内染色、流式细胞术和酶联免疫吸附实验(ELISA)法检测HDAC3作用下iNKT细胞因子水平,实验至少重复3次。结果:与WT小鼠比较,HDAC3KO小鼠胸腺和外周免...

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【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 实验动物、主要试剂和仪器
    1.2 小鼠基因型鉴定
    1.3 流式细胞术分析HDAC3KO小鼠iNKT细胞数量和发育表型
    1.4 骨髓混合嵌合体小鼠制备
    1.5 iNKT细胞活化和细胞内染色分析
    1.6 酶联免疫吸附实验(ELISA）检测HDAC3KO小鼠血清细胞因子水平
    1.7 统计学分析
2 结果
    2.1 HDAC3敲除小鼠基因型鉴定
    2.2 HDAC3敲除小鼠胸腺、脾脏、肝脏和淋巴结中iNKT细胞数量
    2.3 HDAC3敲除小鼠胸腺中iNKT细胞发育的变化
    2.4 HDAC3通过内源性途径对iNKT细胞发育和成熟的调控作用
    2.5 HDAC3敲除小鼠iNKT细胞和血清中IFN-γ和IL-4水平
3 讨论



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