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A型肉毒毒素功能结构域表位抗原免疫保护作用与免疫保护机制研究

发布时间:2023-11-30 19:53
  研究背景:肉毒毒素是肉毒杆菌生长繁殖过程中分泌的一种毒性蛋白,具有很强的神经毒性。根据其抗原性的差异,BoNTs可分成BoNT/A-G 7个类型,其中BoNT/A是毒性最强的物质。疫苗接种是预防肉毒中毒的最有效策略,其中最具研究前景的是新型重组亚单位疫苗。目的:探究A型肉毒毒素各结构域抗原片段中能引起显著免疫保护的最佳靶抗原片段。方法:通过基因工程技术制备了BoNT/A各功能结构域抗原片段并连接到pTIG-Trx原核表达载体上,将构建好的质粒转入大肠杆菌系统中诱导表达,并通过Ni-NTA亲和层析法纯化得到了高纯度的重组抗原(如Hc、HN-L等),并检测各重组抗原的免疫保护作用与免疫保护机制。结果:本研究完成了BoNT/A各功能结构域表位抗原的制备与鉴定,并对各重组抗原的免疫保护效力及免疫保护作用机制进行了研究,结果表明BoNT/A各功能结构域表位抗原中,Hc和HN-L抗原片段具有最好的免疫原性和免疫保护性,重要的中和抗体表位主要集中在毒素分子的Hc和HN-L抗原上,其中Hc有两个,HN-L有一个。结论:Hc受体结合区分子具有合适的大小与制备的便利性,能够产生完全的免疫保护作用,具备比H...

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