ERK1/2信号通路在IGF-1诱导新生小鼠海马神经干细胞增殖分化中的作用

发布时间：2024-01-21 11:16

　　目的:探讨细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)信号通路在胰岛素样生长因子-1(insulin-like growth factor-1,IGF-1)诱导新生小鼠神经干细胞(neural stem cells,NSCs)增殖分化中的作用。方法:取新生C57BL/6J小鼠海马体外分离、培养NSCs,分别加入终浓度100 ng/ml的IGF-1和20μmol/L的抑制剂U0126。CCK-8试剂盒检测IGF-1对NSCs增殖的影响;免疫荧光细胞染色法检测IGF-1对细胞分化的影响;Western blot检测ERK1/2和p-ERK1/2蛋白的表达,并对各组进行比较。结果:CCK-8测定细胞增殖,第3 d U0126组相对OD值显著低于IGF-1组,第7 d时IGF-1组OD值则显著高于对照组和U0126组(P<0.05)。倒置荧光显微镜下可观察到IGF-1组βⅢTubulin和GFAP阳性分化率均明显高于对照组和U0126组(P<0.05)。Western blot结果显示:IGF-1组蛋白表达量显著高于对照组和U0126组(P<0.05),IGF-1促进ERK磷酸化...

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【文章目录】：
材料和方法
    1 材料
    2 方法
        2.1 NSCs的分离培养和鉴定
        2.2 CCK-8试剂盒检测
        2.3 GFAP/βⅢTubulin免疫荧光双标和DAPI核染
        2.4 免疫荧光细胞化学和Western blot检测ERK1/2 磷酸化水平
结果
    1 NSCs体外培养、鉴定
    2 CCK-8检测细胞增殖结果
    3 细胞分化情况
    4 p-ERK1/2的免疫细胞荧光和蛋白表达情况
讨论



本文编号：3881879