多功能心腔内导管移植骨髓间充质干细胞治疗急性心肌梗死的实验研究

发布时间：2024-06-11 19:44

　　目的：探讨犬骨髓间充质干细胞(MSCs)体外分离、纯化、扩增的方法，证实其自我更新能力及多向分化潜能，为细胞移植治疗急性心肌梗死(AMI)做准备。 方法：无菌条件下用骨髓穿刺针获取骨髓液，用密度为1.073g/ml的Percoll分离液通过密度梯度离心法获取骨髓单个核细胞，用含10%胎牛血清的低糖DMEM培养液种植细胞，通过贴壁筛选法获得纯化的MSCs。细胞生长融合达80%左右时，用胰酶消化传代细胞，细胞消化、传代培养三代后，可获得大量的纯度较高的MSCs。对不同代MSCs进行细胞计数，并绘制生长曲线，观察细胞生长特性。应用流式细胞仪对MSCs表面标记蛋白CD29、CD34进行表面抗原鉴定。取第3代MSCs分别进行成骨组织以及脂肪组织的诱导分化，通过茜素红以及油红O染色检测是否诱导分化为成骨组织以及脂肪组织。 结果：采用密度梯度法获得犬骨髓单个核细胞，刚分离的细胞体积较小，呈圆形。细胞培养72小时后观察可见单个或少量成集落样生长的贴壁细胞克隆，形态大多呈短梭形，原代细胞培养10-12天达到传代标准。细胞传代后增殖较快，MSCs生长曲线绘制显示，MSCs生长曲线呈S型，第6-7天生长达到...

【文章页数】：93 页

【学位级别】：博士

【文章目录】：
英汉缩略语名词对照
中文摘要
英文摘要
前言
第一部分 犬骨髓间充质干细胞体外分离、培养及其生物学性质的研究
    1 材料和方法
    2 结果
    3 讨论
    4 小结
    参考文献
    附图
第二部分 多功能心腔内导管移植骨髓间充质干细胞治疗急性心肌梗死的实验研究
    第一节 多功能心腔内导管移植骨髓间充质干细胞对犬梗死心肌血管新生的影响
        1 材料和方法
        2 结果
        3 讨论
        4 小结
        参考文献
        附图
    第二节 多功能心腔内导管移植骨髓间充质干细胞对犬心室重构的影响
        1 材料和方法
        2 结果
        3 讨论
        4 小结
        参考文献
        附图
全文小结
本研究的局限性
文献综述一
    参考文献
致谢
攻读博士期间发表论文



本文编号：3992621