α7nAChR的克

发布时间：2024-02-19 17:29

　　本课题的目的在于建立表达α7的分子生物学方法，通过研究α7和Aβ1-42在体内和体外的关系，初步探讨α7在Alzheimer病发病机制中的作用；寻找反映AD患者α7变化的指标，为AD的实验室检查提供一种新的手段。第一部分应用PCR方法，以胎脑cDNA为模板，扩增出编码α7的全长cDNA序列，经克隆、测序鉴定后，构建真核表达质粒pNASS-CMV-α7-Neo和体外合成质粒5’-UTR-α7-pSP64polyA，在H4细胞中表达α7并在体外合成有活性的α7，在此基础上，在细胞水平和蛋白质水平观察α7和Aβ1-42的结合。结果显示：体外合成的活性α7在一定条件下能与Aβ1-42进行牢固的结合；α7在H4细胞中有高效、稳定的表达，但表达部位主要在细胞内，不适合进一步的功能研究；在克隆过程中还发现脑内除α7外，尚存在α7的两种可变剪接（外显子4缺失和外显子4、5缺失两种）。第二部分应用免疫组织化学方法，观察α7在3例临床和病理证实的AD患者脑中的表达及与Aβ1-42的关系。抗α7和抗Aβ1-42分别染色结果发现：AD脑中有α7的异常沉积，其沉积部位与Aβ1-42形成的老年斑的沉积部位一致，主...

【文章页数】：91 页

【学位级别】：博士

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中文摘要
英文摘要
前言
第一部分 α7nAChR的克隆、表达及与Aβ的结合
    材料和方法
    结果
    讨论
    小结
第二部分 α7nAChR在AD脑中的表达及与Aβ的关系
    材料和方法
    结果
    讨论
    小结
第三部分 AD患者周围血α7及duplicate α7 mRNA水平的检测
    材料和方法
    结果
    讨论
    小结
全文结语
参考文献
综述
参考文献
致谢
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本文编号：3903064