灌饲牙龈卟啉单胞菌对小鼠肠道菌群以及肠道和脾脏炎症影响的研究

发布时间：2023-05-07 18:20

　　目的:牙周病是一种由口腔菌群失调所介导的慢性炎症性疾病,已成为许多全身性疾病,如冠心病、阿尔兹海默病、脊柱关节炎及炎性肠病等的危险因素。一些特定的牙周致病菌,如牙龈卟啉单胞菌(Porphyromonas gingivalis)及其菌体成分在这些疾病的发生发展过程中可能起着重要作用。有研究结果显示,灌饲一次P.gingivalis便能够对肠道微生物群的组成和肠道屏障功能产生显著影响,并导致肠道细菌向肝脏扩散以及内毒素血症的发生,但其诱导肠道及全身炎症的机制尚不明了。本实验采用P.gingivalis灌饲小鼠,观察其诱导肠道及脾脏组织的炎症作用,旨在探究该菌对消化系统的影响及其可能机制,并为牙周病与消化系统疾病之间的内在联系提供依据。方法:将P.gingivalis W83液体增菌计数后用于后续实验。10只C57BL/6小鼠适应一周后随机分为两组,实验组灌饲1?10⁹ CFU P.gingivalis(0.2 mL PBS重悬),对照组则灌饲等量无菌PBS。每只小鼠每天称重后灌饲一次,共灌饲6周。6周后处死小鼠,采集盲肠内容物以及结肠及脾脏组织。提取盲肠内容物的细菌D...

【文章页数】：50 页

【学位级别】：硕士

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摘要
Abstract
英文缩略语
1 前言
2 材料与方法
    2.1 主要试剂与仪器
        2.1.1 主要试剂
        2.1.2 仪器设备
    2.2 实验方法
        2.2.1 细菌培养
        2.2.2 动物培养、分组及处理
        2.2.3 盲肠内容物Illumina PE250 测序实验
        2.2.4 脾指数测定
        2.2.5 实时定量PCR(q RT-PCR)反应
        2.2.6 Western blot检测蛋白表达
        2.2.7 H&E染色
        2.2.8 统计学分析
3 结果
    3.1 肠道菌群变化
        3.1.1 样本多样性分析
        3.1.2 组间(样本间)比较分析
        3.1.3 物种组成及差异分析
    3.2 肠道炎症表现
        3.2.1 小鼠结肠H&E切片结果
        3.2.2 小鼠结肠炎性细胞表面标志物及细胞因子的表达
    3.3 脾脏炎症表现
        3.3.1 小鼠的体重变化及脾指数变化
        3.3.2 小鼠脾脏细胞因子的表达
        3.3.3 小鼠脾脏IFN-γ及IRF-1 的蛋白质表达结果
        3.3.4 小鼠脾脏中STAT1及STAT3 的磷酸化水平
4 讨论
5 结论
本研究创新性的自我评价
参考文献
综述
    参考文献
攻读学位期间取得的研究成果
致谢
个人简历



本文编号：3811091