酵母β-葡聚糖改善THP-1/3T3-L1细胞体系胰岛素敏感性的研究

发布时间：2024-05-07 04:05

　　目的:探究不可溶性及可溶性的酵母β-葡聚糖对THP-1/3T3-L1细胞体系胰岛素敏感性的改善作用及其相关机制。方法:利用诱导分化的THP-1巨噬细胞和3T3-L1脂肪细胞,构建THP-1/3T3-L1细胞体系模拟脂肪组织炎症状态;利用CCK-8试验检测细胞活性,选取合适的干预剂量和干预时间;采用干预剂量为0、10、20、50、100μg/mL的浓度梯度,干预时间为48 h,利用不可溶性酵母β-葡聚糖和可溶性酵母β-葡聚糖干预诱导分化完全的THP-1巨噬细胞,并提取干预后的细胞上清液,在3T3-L1脂肪细胞诱导分化的全过程加入该上清液进行干预诱导;利用电化学发光法和ELISA试剂盒检测干预后巨噬细胞上清液中的炎症因子IL-1β、IL-6、IL-10、TNF-α、TGF-β水平;利用甘油三酯试剂盒检测3T3-L1脂肪细胞内的甘油三酯水平;利用荧光标记葡萄糖类似物2-NBDG进行胰岛素刺激的葡萄糖摄取实验;采用Western Blot实验检测IRS-1、p-IRs-1、AKT、p-AKT、adiponectin等蛋白质水平。结果:(1)与对照组相比,不可溶性酵母β-葡聚糖干预后的THP-1...

【文章页数】：44 页

【学位级别】：硕士

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摘要
ABSTRACT
前言
1 材料和方法
    1.1 试剂及仪器
    1.2 溶液配制
    1.3 研究方法
        1.3.1 THP-1/3T3-L1细胞体系的构建
        1.3.2 细胞活性检测
        1.3.3 酵母β-葡聚糖细胞干预
        1.3.4 ELISA及电化学发光法检测细胞因子
        1.3.5 葡萄糖摄取实验
        1.3.6 甘油三酯测定
        1.3.7 WesternBlot实验
    1.4 统计学方法
2 结果
    2.1 细胞活性检测
    2.2 酵母β-葡聚糖对THP-Ma细胞因子分泌的影响
        2.2.1 不可溶性β-葡聚糖对THP-Ma细胞因子分泌的影响
        2.2.2 可溶性β-葡聚糖对THP-Ma细胞因子分泌的影响
    2.3 THP-Ma细胞上清对3T3-L1细胞分化及胰岛素敏感性的影响
    2.4 酵母β-葡聚糖对3T3-L1脂质生成及胰岛素敏感性的影响
        2.4.1 不可溶性酵母β-葡聚糖对3T3-L1脂质生成及胰岛素敏感性的影响
        2.4.2 可溶性酵母β-葡聚糖对3T3-L1脂质生成及胰岛素敏感性的影响
3 讨论
4 结论
参考文献
综述
    参考文献
附录
致谢



本文编号：3966793