番荔素类成分对黑色素瘤的抗癌作用及其机制研究

发布时间：2017-04-09 11:17

  本文关键词：番荔素类成分对黑色素瘤的抗癌作用及其机制研究，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：番荔索类成分是番荔枝科植物的特征性成分之一,具有很强的体内外抗肿瘤作用,且抗瘤谱广。本论文在已有的工作基础上,研究番荔素类成分对黑色素瘤细胞的抑制活性及其作用机制,以期为番荔素类成分在抗肿瘤药物上的开发和利用提供科学的理论依据。 1、粗提物AS9(为番荔枝Annona Squamosa中子的提取物,主要含有番荔素类成分)和3种番荔枝内酯类单体Desacetyluvaricin去乙酰紫玉盘素)、Bullatacin泡番荔枝辛)、Squamocin(番荔辛)对人黑色素瘤A875、A375和小鼠黑色素瘤B16细胞的增殖抑制作用研究。采用体外SRB检测法,酶标仪测定其光密度值,计算IC50值,从而确定敏感瘤株。结果表明：粗提物AS9和单体化合物Desacetyluvaricin、Squamocin、Bullatacin均可显著抑制黑色素瘤A875、A375、B16细胞的增殖,并呈现浓度依赖效应。Desacetyluvaricin对人黑色素瘤A375细胞抑瘤效果最好,IC50为0.71μg/mL; Squamocin对人黑色素瘤A875细胞有很强的杀伤作用,IC50为0.06μg/mL;而AS9和Bullatacin对B16细胞的IC50分别为5.93μg/mL、2.07μg/mL。 2、粗提物AS9对黑色素瘤A875细胞抑瘤机制研究。采用H33342/PI双染法观察细胞核形态变化,荧光倒置显微镜下可见A875细胞核染色质随着AS9浓度的升高逐渐聚积在一起,并且发生皱缩、边缘化,细胞核内出现致密的颗粒状或块状荧光,多数细胞核发生碎裂；乳酸脱氢酶LDH含量测定检测其与活细胞的比例变化关系,结果发现乳酸脱氢酶的释放率随着AS9浓度的升高而逐渐增大,培养基中LDH的含量与死细胞成正比例关系；利用Annexin V/PI双、单染流式细胞技术检测AS9对人黑色素瘤A875细胞周期及凋亡影响,结果显示,AS9主要将细胞阻滞在G1期,并以浓度依赖的方式诱导A875细胞凋亡。 3、利用Annexin V/PI双染、PI单染流式细胞仪技术检测,发现Desacetyluvaricin可明显诱导黑色素瘤A375细胞凋亡,并且将细胞阻滞在S期,阻断其向G2期转化,从而抑制黑色素瘤细胞增殖。
【关键词】：番荔素类成分 粗提物AS9 去乙酰紫玉盘素 黑色素瘤 抑瘤作用 SRB法 细胞周期 细胞凋亡
【学位授予单位】：吉林农业大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2013
【分类号】：R285;R739.5
【目录】：

• 摘要4-5
• ABSTRACT5-9
• 前言9-10
• 第一篇 文献综述10-18
• 第一章 番荔素类成分的抗肿瘤研究进展10-17
• 1.1 番荔素类成分的结构类型10-11
• 1.2 番荔素类成分的构效关系11
• 1.3 番荔素类成分的抗肿瘤活性研究11-12
• 1.4 番荔素类成分的抗肿瘤机制研究12-16
• 1.5 小结16-17
• 第二章 黑色素瘤简介17-18
• 第二篇 研究内容18-44
• 第一章 番荔素类成分体外抗黑色素瘤活性筛选18-28
• 1.1 材料和方法18-21
• 1.2 结果21-26
• 1.3 讨论26-27
• 1.4 小结27-28
• 第二章 AS9对人黑色素瘤A875细胞的抑瘤机制研究28-39
• 2.1 H33342/PI荧光染色法28-30
• 2.2 乳酸脱氢酶LDH测定实验30-32
• 2.3 流式细胞仪检测AS9对人黑色素瘤A875细胞凋亡的影响32-35
• 2.4 流式细胞仪检测AS9对人黑色素瘤A875细胞周期的影响35-37
• 2.5 小结37-39
• 第三章 DESACETYLUVARICIN对A375细胞周期及凋亡影响的研究39-44
• 3.1 材料和方法39-40
• 3.2 结果40-42
• 3.3 讨论42-43
• 3.4 小结43-44
• 结论44-46
• 参考文献46-51
• 作者简介51-52
• 致谢52

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前6条

1 周宁宁,朱孝峰,李志铭,谢冰芬,刘宗潮,冯公侃,姜文奇,谢海辉,吴淑君,杨仁洲,魏孝义;番荔枝内酯化合物squamocin诱导白血病HL-60细胞凋亡[J];癌症;2000年12期

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3 张晓晖,姚天明,黄高f,王文亮;细胞凋亡的最新研究进展[J];第四军医大学学报;2002年S1期

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6 ;A New Cytotoxic Acetogenin from the Seeds of Annona squamosa[J];Chinese Chemical Letters;2003年06期

  本文关键词：番荔素类成分对黑色素瘤的抗癌作用及其机制研究，，由笔耕文化传播整理发布。

本文编号：295146