中国麻风分枝杆菌耐药基因突变检测

发布时间：2017-04-30 13:17

  本文关键词：中国麻风分枝杆菌耐药基因突变检测，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：研究背景:麻风(leprosy)是一种由麻风分枝杆菌(Mycobacterium leprae,M.leprae)引起的慢性传染病,主要侵犯皮肤和外周神经,并可以导致不可逆性的神经功能损害和慢性畸残。当前麻风的控制策略是基于1982年世界卫生组织推荐的多药联合化疗(multidrug therapy,MDT)方案。氨苯砜、利福平及氯丙酚嗪被用于多菌型麻风的治疗,而氨苯砜和利福平被用于少菌型麻风的治疗。氧氟沙星是治疗单发性皮损的关键药物。然而自1964年起,氨苯砜、利福平及氧氟沙星耐药逐渐被报道,甚至出现了多重耐药。最近的研究证实三种药物的抵抗分别与Folp1,RpoB和GyrA基因上的特定的耐药决定区域(DRDRs)突变有关。之后多个国家和地区进行了三种药物耐药基因突变位点的检测,结果显示耐药率各不相同。实验目的:1.检测我国山东地区麻风病人的麻风分枝杆菌中是否存在耐氨苯砜、利福平及氧氟沙星突变;2.统计山东地区耐氨苯砜、利福平及氧氟沙星菌株的出现频率。实验方法:收集麻风患者的皮损组织标本,提取麻风分枝杆菌DNA,然后进行Folp1,RpoB和GyrA基因目的片段的扩增,对PCR扩增产物进行纯化,并直接对目的片段测序进行序列分析,从而检测突变位点。实验结果:在67例Folp1片段中,发现1例突变;在57例RpoB片段中,有5例突变;在81例GyrA样本中,发现21例突变。三基因片段的突变频率分别是1.5%,8.8%及25.9%。另外,在三例新发麻风患者中发现了多重耐药菌株,1例为Folp1基因和RpoB基因的突变,2例为RpoB基因和Gyr A基因的突变。结论:首先,我们的研究表明在新发麻风病例中,耐氨苯砜菌株出现频率较低,同时多重耐药麻风分枝杆菌的频率也较低。其次,我们在中国首次报道了原发性的多重耐药麻风分枝杆菌菌株。
【关键词】：麻风分枝杆菌 耐药 Folp1基因 RpoB基因 GyrA基因
【学位授予单位】：济南大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R440;R755
【目录】：

• 中文摘要7-9
• 英文摘要9-11
• 英文缩略词11-12
• 第一章 前言12-15
• 第二 章实验材料与方法15-35
• 2.1 研究对象15
• 2.2 实验试剂15-17
• 2.3 实验仪器17-18
• 2.4 分析软件和电子数据库查询信息18
• 2.5 实验方法18-35
• 第三章 结果35-39
• 3.1 临床资料35
• 3.2 测序结果35-39
• 第四章 讨论39-43
• 4.1 讨论39-42
• 4.2 展望42-43
• 第五章 结论43-45
• 参考文献45-47
• 附录47-52
• 综述52-59
• 参考文献57-59
• 攻读学位期间发表的论文59-60
• 致谢60

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