端粒酶检测在银屑病中的意义及喜树碱和喜树异碱抗银屑病作用的研究

发布时间：2022-01-04 22:56

　　目的:端粒酶是一种核糖核蛋白复合物,能以自身RNA 成分为模板催化染色体末端端粒重复序列的延伸,使细胞得以持续增殖甚至永生化。绝大多数恶性肿瘤和某些炎性增生性疾病包括银屑病伴有端粒酶活性的增高。银屑病是一种T 细胞介导的免疫性疾病,存在角质形成细胞的增殖和凋亡异常。端粒酶活性与银屑病角质形成细胞的增殖和凋亡及T 细胞的活化密切相关,本研究将喜树碱和一种新的喜树碱类化合物喜树异碱作用于人永生化表皮细胞和人脐静脉血管内皮细胞,观察两种药物对细胞增殖、凋亡及端粒酶活性的影响,以探讨喜树碱类药物抗银屑病作用的可能机制;同时观察寻常型银屑病患者外周血单个核细胞的端粒酶活性及与疾病严重程度的相关性,以探讨端粒酶活性检测在银屑病中的作用。方法:将不同浓度的喜树碱和喜树异碱分别作用于体外培养的HaCaT 细胞和ECV304 细胞,用MTT 法检测两种药物对HaCaT 细胞增殖的抑制作用及有效浓度范围;倒置显微镜和透射电镜观察细胞处理后的形态学变化;流式细胞仪检测细胞周期及凋亡;端粒重复序列扩增-酶联免疫吸附（TRAP-ELISA）法检测细胞的端粒酶活性。密度梯度离心法分离19 名寻常型银屑病患者和13... 

【文章来源】：大连医科大学辽宁省

【文章页数】：60 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

光镜下观察不同浓度喜树碱作用48小时HaCaT的细胞形态变化（10х20）

. 2μg/ml 喜树碱 D. 4μg/ml 喜树碱 2 光镜下观察不同浓度喜树碱作用 48 小时 HaCaT 的细胞形态变化（10х2电镜下观察有典型的凋亡细胞出现，细胞微绒毛明显减少，细积缩小，胞浆内细胞器减少，细胞浆浓缩，核碎裂，核仁变小，质致密呈斑块状，聚集于核膜成境界分明的新月体状，细胞膜出泡现象，可见典型的凋亡小体（图 3）。

C. 2μg/ml 喜树碱 D. 4μg/ml 喜树碱图 4 不同浓度喜树碱作用 48 小时对 HaCaT 细胞周期和细胞凋亡的影响表 2 不同浓度的喜树碱对 HaCaT 细胞周期的影响药物浓度 48h（μg/ml） G1(%) S(%) G2/M(%) Ap(%)012461.256.547.638.230.740.350.861.88.13.21.60---1.48.49.8（四）PCR-ELISA 法检测喜树碱对细胞端粒酶活性的影响根据上述实验结果，2μg/ml 的喜树碱作用 48 小时诱导 HaCaT

【参考文献】：
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本文编号：3569211