miR-17-3p对角质形成细胞增殖的影响

发布时间：2022-02-04 20:16

　　目的研究miR-17-3p在银屑病组织来源的角质形成细胞中的表达及其对角质形成细胞增殖的影响和机制。方法分离培养银屑病和正常皮肤组织来源的角质形成细胞,实时定量聚合酶链反应（RT-qPCR）测定miR-17-3p表达。在正常皮肤组织来源的角质形成细胞中分别转染mimics control、miR-17-3p mimics、inhibitor control、miR-17-3p inhibitor,命名为第1转染组、第2转染组、第3转染组、第4转染组。在正常皮肤组织来源的角质形成细胞中共转染miR-17-3p mimics、pcDNA 3.1和miR-17-3p mimics、pcDNA 3.1-缺氧诱导因子1α（HIF-1α）,分别命名为第5转染组和第6转染组;在正常皮肤组织来源的角质形成细胞中共转染miR-17-3p inhibitor、siRNA control和miR-17-3p inhibitor、HIF-1αsiRNA,分别命名为第7转染组和第8转染组。用噻唑蓝（MTT）检测细胞增殖活性,用蛋白质免疫印迹法（Western Blot）检测细胞角蛋白10（Keratin10）、... 

【文章来源】：中国临床药理学杂志. 2020,36(19)北大核心CSCD

【文章页数】：4 页

【文章目录】：
材料与方法
    1 材料
    2 实验方法
        2.1 角质形成细胞分离培养
        2.2 细胞转染
        2.3 以噻唑蓝(methylthiazolyldiphenyl-tetrazolium bromide,MTT)测定细胞增殖情况
        2.4 以实时定量聚合酶链反应(quantitative real time polymerase chain reaction, RT-qPCR)检测银屑病和正常皮肤组织来源的角质形成细胞中miR-17-3p相对表达
        2.5 以蛋白质免疫印迹(Western Blot)检测细胞中Keratin10、Keratin14和HIF-1α蛋白相对表达
        2.6 miR-17-3p靶向关系预测和鉴定
    3 统计学处理
结 果
    1 miR-17-3p对角质形成细胞存活率的影响
    2 各组细胞miR-17-3p mRNA表达
    3 各组细胞Keratin14、Keratin10和HIF-1α蛋白表达
    4 miR-17-3p和HIF-1α靶向关系验证
讨 论



本文编号：3613872