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中性粒细胞弹性蛋白酶和trappin-2蛋白在银屑病中表达及功能的研究

发布时间:2022-02-17 11:31
  一、研究背景和目的银屑病(psoriasis)是一种常见易复发的慢性炎症性皮肤病,对患者的身心健康影响甚大。长期以来银屑病是皮肤病领域研究的重点和热点,较为公认的是T细胞介导的自身免疫反应性炎症机制,但一些临床现象却不能完全用T细胞诱导的免疫损伤来解释。银屑病最常见的是寻常型,其特征性病理改变为Munro微脓肿,表现为皮肤角质层内中性粒细胞(polymorphonuclear neutrophils,PMNs)聚集。Munro微脓肿仅存在于角化不全区,该区角质形成细胞(keratinocyte,KC)有丝分裂率明显增高。从临床角度看,寻常型银屑病同一块皮损可分为“慢性”和“急性”区,“慢性”区镜下为真皮内T细胞大量浸润并向表皮趋化移行,“急性”区镜下则可见Munro微脓肿形成。“慢性”区恢复较快,而“急性”区对治疗抵抗,恢复较慢。这种临床和组织学上具有的“异质性”特点提示PMNs在寻常型银屑病发病中必然起着某种作用。而脓疱型银屑病的病理表现为海绵状脓疱(Kogoj脓肿),疱内大量PMNs浸润,此处KC的增殖水平甚至高于寻常型银屑病。不同条件下,PMNs在银屑病发病中的作用及其机制仍缺乏... 

【文章来源】:中国人民解放军陆军军医大学重庆市

【文章页数】:107 页

【学位级别】:博士

【部分图文】:

中性粒细胞弹性蛋白酶和trappin-2蛋白在银屑病中表达及功能的研究


质粒pIRES2-EGFP示意图

模型图,银屑病,器官培养,模型图


40图 2-3 银屑病跨膜器官培养模型图片及高表达 trappin-2 细胞上清液对银屑病跨膜模型增表达 trappin-2 细胞上清液刺激条件实验分组:来源于同一患者的银屑病跨膜模型稳定的 KC-SFM,另设空白对照。 trappin-2 细胞上清液刺激实验分组:来源于同一患者

测序,质粒,细胞,转染


图 2-6 质粒 pIRES2-EGFP-trappin-2 cDNA 测序图三、HeLa 细胞 G418 筛选浓度的确定观察至第 7d,G418 浓度为 500μg/ml 及其以上各浓度各孔的细胞全部死亡,故以 600μg/ml 作为 HeLa 细胞转染后的 G418 筛选浓度。四、Trappin-2 基因表达的鉴定1. EGFP 的表达检测转染 36hr 后,用激光共聚焦显微镜可观察到 pIRES2-EGFP-trappin-2 转染的HeLa 细胞中 EGFP 的有效表达,60%以上的细胞出现绿色荧光。pIRES2-EGFP 空质粒转染的 HeLa 细胞中同样可以观察到 EGFP 的表达(图 2-7)。

【参考文献】:
期刊论文
[1]中性粒细胞弹性蛋白酶和elafin蛋白与皮肤肿瘤[J]. 阎衡,叶庆佾,郝飞.  中国皮肤性病学杂志. 2007(02)
[2]银屑病与免疫分子调控网络[J]. 田晗,郑捷.  国际皮肤性病学杂志. 2006(01)
[3]细胞外信号调节激酶信号通路在中性粒细胞弹性蛋白酶介导气道黏液高分泌中的作用[J]. 徐晓艳,周向东.  中国呼吸与危重监护杂志. 2005(06)
[4]寻常性银屑病患者血清α肿瘤坏死因子水平及生物学活性检测与相关性研究[J]. 冯峥,张郁,李恒进,黎燕.  临床皮肤科杂志. 2005(06)
[5]中性粒细胞弹性蛋白酶与黏蛋白[J]. 徐晓艳,周向东.  中国药物与临床. 2004(10)
[6]脓疱性银屑病分类进展[J]. 王刚,高天文,刘玉峰.  中华皮肤科杂志. 2004(03)
[7]ICAM-1、IGF-1在银屑病皮损中的表达[J]. 李红文,丁一,邓新国,秦艳茹.  中国皮肤性病学杂志. 2001(05)
[8]皮肤病的Th1/Th2模式[J]. 阎衡.  国外医学.皮肤性病学分册. 2001(05)
[9]加压负压吸疱与磨削自体表皮移植治疗白癜风[J]. 许庆芳,王侠生,陈志和,翁智胜,梁瑞珍,彭洁雯.  中国麻风皮肤病杂志. 2001(03)
[10]趋化因子与银屑病[J]. 唐玲,李泉.  国外医学.皮肤性病学分册. 2001(02)



本文编号:3629356

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