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直流电场和紫外线对脂肪干细胞的作用及机制研究

发布时间:2024-02-04 16:09
  目的:脂肪干细胞是一种间充质干细胞,具有自我更新的特性和多向分化潜能。脂肪干细胞来源丰富、伦理限制少、具有跨胚层分化能力,是一种十分理想的组织工程学种子细胞。因此,脂肪干细胞向已知分化谱系之外其他细胞分化的可能性和条件,是值得研究者持续关注的领域。电信号广泛存在于生物体内,在传递信息和实现功能等方面起着不可或缺的作用。内源性直流电场作为生物体内电信号的一种表现形式,对于胚胎发育和创伤愈合等过程极为重要,而完成这些过程又与干细胞的增殖、迁移和分化密切相关。然而,关于脂肪干细胞在直流电场中反应的研究较少。皮肤科治疗方式中紫外线光疗的历史悠久、应用广泛,尤其是在白癜风的治疗中起到重要作用。紫外线具有改变表皮分泌细胞因子特性,诱导DNA损伤和细胞凋亡,促进黑素细胞增殖、迁移及提高其活性等功能。紫外线还可以促进黑素前体细胞分化为黑素细胞。然而脂肪干细胞是否能分化为黑素细胞,紫外线能否启动或促进这个过程,仍等待着人们去揭示。因此,为了探讨直流电场和紫外线分别对脂肪干细胞起到什么样的作用,是否可以对组织工程学和再生医学的种子细胞有指导意义,我们展开了以下研究。研究方法:1、本研究利用胶原酶消化法从人...

【文章页数】:103 页

【学位级别】:博士

【部分图文】:

图1流式细胞术鉴定脂肪干细胞表面标志物及脂肪干细胞成脂、成骨分化

图1流式细胞术鉴定脂肪干细胞表面标志物及脂肪干细胞成脂、成骨分化

油红O可将脂肪特异性染为红色,而茜素红可使钙沉积特异性染色,产生桔红色钙结节。图中所示为染成红色的脂滴和染成橘红色的骨钙沉积,证实所用细胞具有分化为脂肪细胞和骨细胞的潜能。3.2直流电场使脂肪干细胞定向排列


图2电场为0或300mV/mm对脂肪干细胞排列的影响

图2电场为0或300mV/mm对脂肪干细胞排列的影响

在300mV/mm的直流电场中暴露6h后,脂肪干细胞形态与之前相比有所不同,细胞长轴变短,这提示我们细胞可能进行了运动,改变了细胞骨架形态。镜下细胞排列较整齐,细胞长轴垂直于电场方向。将细胞放回培养箱中培养,24h后再次拍照,可发现细胞由之前形态转变为长梭形,排列整齐,且细胞....


图3凝胶电泳检测RNA质量

图3凝胶电泳检测RNA质量

我们检测了6个总RNA样品的OD260/280比值,发现其在1.81-1.87之间。各样品的的总RNA浓度、RNA完整性和gDNA污染检测结果均为通过。3.4RNA表达谱及差异RNA聚类


图4差异RNA热图以及RNA表达谱火山图

图4差异RNA热图以及RNA表达谱火山图

通过火山图和热图,我们可以较直观地发现,除circRNA外,其余三种RNA无论是总体表达还是差异表达子集,均是下调RNA比例占优,这可能和电场使细胞处于一种类似应激的状态有关。3.5非编码RNA相关基因的GO、KEGG通路富集分析



本文编号:3895491

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