梅毒螺旋体耐四环素类抗生素耐药基因突变位点检测

发布时间：2017-07-14 10:23

  本文关键词：梅毒螺旋体耐四环素类抗生素耐药基因突变位点检测

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【摘要】：研究背景:梅毒是由梅毒螺旋体感染引起的性传播疾病,主要通过性接触和母婴传播。1943年青霉素首次用于梅毒的治疗以来,始终是梅毒治疗的首选药物。近年来,四环素类抗生素(多西环素/四环素)作为替代治疗药物,广泛用于梅毒的治疗,四环素类抗生素具有抑制细菌作用,通过可逆性结合30S核糖体亚单位的16S rRNA抑制蛋白合成发挥作用。细菌对四环素类药物的耐药机制分两类:(1)获得四环素耐药基因,四环素耐药基因广泛分布于人源、动物源和环境性条件病原菌、病原菌及共生菌的不同菌种,tetB基因的宿主范围最广,在口腔和消化道的伴放线杆菌、流感嗜血杆菌等20多种革兰氏阴性菌属中均有分布,螺旋体属中齿垢密螺旋体中亦有分布。(2)16S rRNA基因点突变,16S rRNA基因的926-928,939,965-967以及1058位点均为已报道的革兰氏阴性菌(幽门螺旋杆菌和猪痢疾短螺旋体)对四环素或强力霉素的耐药位点。在世界范围内进行四环素类抗生素治疗梅毒的疗效监测,并警惕其耐药菌株的出现,显得尤为重要。实验目的:一、研究TP菌株是否存在四环素类抗生素耐药基因(tetB基因)及突变位点(16S rRNA基因)。二、评价山东地区四环素类抗生素治疗早期梅毒的有效性。三、评估山东地区四环素类抗生素能否作为治疗梅毒的替代药物。实验方法:收集疑似梅毒患者肛门及生殖器部位皮疹或溃疡处标本,提取梅毒螺旋体DNA,经实时荧光定量PCR证实为梅毒螺旋体,然后PCR扩增后电泳检测是否存在tetB基因片段,另外进行16S rRNA基因目的基因片段的扩增,测序进行序列分析,检测是否存在突变位点。实验结果:本研究171例梅毒螺旋体菌株中,15例检测出四环素类抗生素获得性耐药基因tetB基因,16S rRNA基因目的片段均未检测出突变位点。结论:梅毒螺旋体获得性四环素耐药基因tetB基因既往未见报道。Tet B基因可能是梅毒螺旋体四环素类抗生素的耐药基因,应持续进行四环素类抗生素治疗梅毒的疗效监测,并警惕其耐药菌株的出现。
【关键词】：梅毒螺旋体 四环素类抗生素 16S rRNA基因 tetB基因
【学位授予单位】：济南大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R440;R759.1
【目录】：

• 摘要6-7
• Abstract7-9
• 英文缩略词表9-10
• 第一章 前言10-17
• 1.1 梅毒螺旋体感染与致病10
• 1.2 梅毒治疗现状10-11
• 1.3 多西环素应用的疗效监测11-13
• 1.4 TP对四环素类抗生潜在的耐药机制13-17
• 第二章 实验材料与方法17-38
• 2.1 研究对象17
• 2.2 实验试剂17-20
• 2.3 实验仪器20-21
• 2.4 分析软件21
• 2.5 实验方法21-38
• 第三章 实验结果38-41
• 3.1 样本资料38
• 3.2 突变检测38-41
• 第四章 讨论41-45
• 第五章 展望45-47
• 参考文献47-51
• 附录 A51-52
• 附录 B52-55
• 攻读学位期间取得的研究成果55-56
• 致谢56

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本文编号：540734