论文一：羊痘1例 论文二：miR-181b-5p抑制物对人皮肤鳞癌SCC12细胞增殖、周期、凋亡、迁移和侵袭的影响

发布时间：2017-07-29 05:24

  本文关键词：论文一：羊痘1例 论文二：miR-181b-5p抑制物对人皮肤鳞癌SCC12细胞增殖、周期、凋亡、迁移和侵袭的影响

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【摘要】：目的:讨论羊痘的临床特点及预防。方法:分析我院收治的1例羊痘的临床特点、诊疗经过并进行文献综述。结果:患者发病前给病山羊喂药1次,病羊口周有多处破溃。1周后患者右手拇指、手背及前臂出现结节伴瘙痒。皮损为暗红色结节,质地坚硬,中央有脐凹、结痂,结痂周围有灰白色晕。组织病理示:表皮棘层肥厚,呈指状向下延伸,真皮可见大量增生和扩张的毛细血管及弥漫性炎细胞浸润,以淋巴细胞、嗜酸性粒细胞、中性粒细胞为主。诊断:羊痘。结论:(1)在非牧区偶尔接触病羊也有感染羊痘病毒的风险,要引起重视。(2)直接与病羊及病羊污染的物质接触是发生人山羊痘病毒感染的主要原因,因此与病羊接触时要做好个体防护。并且对羊痘病羊隔离并对其污染物进行严格消毒处理。目的:通过脂质体Lipofectamine 2000转染mi R-181b-5p抑制物到皮肤鳞状细胞癌SCC12细胞,探讨mi R-181b-5p抑制物对皮肤鳞状细胞癌SCC12细胞增殖、细胞周期、凋亡、侵袭、迁移功能的影响。方法:1.应用RT-PCR法(Real-time PCR,实时荧光定量PCR)检测mi R-181b-5p在人永生化角质形成细胞Ha Ca T细胞与人皮肤鳞状细胞癌SCC12细胞中的表达差异。2.通过脂质体Lipofectamine 2000转染GFP到SCC12,并先后用倒置荧光显微镜和流式细胞术测定转染状态和效率。3.将SCC12细胞随机分为实验组、阴性对照组和正常细胞对照组。实验组转染mi R-181b-5p抑制物(mi R-181b-5p inhibitors)抑制其细胞内mi R-181b-5p的表达,阴性对照组转染抑制物阴性对照核苷酸序列(micro RNA inhibitors negative control),正常细胞对照组不做转染。4.用RT-PCR法分别测转染48小时后三组细胞内mi R-181b-5p表达情况。5.采用CCK8法、细胞周期实验检测mi R-181b-5p inhibitors对SCC12细胞增殖的影响。6.采用流式细胞术检测mi R-181b-5p inhibitors对SCC12细胞凋亡的影响。7.采用transwell检测mi R-181b-5p inhibitors对SCC12细胞侵袭、迁移的影响。结果:1.Mi R-181b-5p在SCC12细胞中的表达明显高于Ha Ca T细胞(P0.05),其表达量约为Ha Ca T细胞的1.82倍。2.转染后细胞状态良好,且转染效率可达(95.6±0.4)%。3.实验组SCC12细胞中mi R-181b-5p的表达水平明显低于阴性对照组和正常细胞对照组(P0.05)。4.CCK8法检测显示,与阴性对照组和正常细胞对照组比较,实验组细胞的增殖能力均显著下降(P0.05),阴性对照组和正常细胞对照组之间的增殖能力无明显差异(P0.05)。5.流式细胞仪检测细胞周期,分析结果显示,实验组G1期细胞所占百分比明显高于阴性对照组和正常细胞对照组(P0.05),而S期细胞所占百分比明显低于阴性对照组组和正常细胞对照组(P0.05),而阴性对照组和正常细胞对照组之间的G1期和S期无明显差异(P0.05)。即mi R-181b-5p inhibitors可将SCC12细胞阻滞于G1期。6.流式细胞仪检测细胞凋亡率,分析结果显示,实验组与阴性对照组和正常细胞对照组相比,其凋亡率均显著上升(P0.05),阴性对照组和正常细胞对照组相比凋亡率无明显差异(P0.05)。7.Transwell小室迁移实验结果显示,与阴性对照组和正常细胞对照组相比,实验组迁移到下室的细胞数目无明显差异(P0.05),即mi R-181b-5p inhibitors对SCC12细胞迁移能力无影响。8.Transwell小室侵袭实验结果显示,实验组侵袭到下室的细胞数目分别与阴性对照组和正常细胞对照组相比,细胞数目无明显差异(P0.05),即mi R-181b-5p inhibitors对SCC12细胞侵袭能力无影响。结论:1.皮肤鳞状细胞癌SCC12细胞中mi R-181b-5p较Ha Ca T细胞高表达。2.Mi R-181b-5p inhibitors可通过抑制皮肤鳞状细胞癌SCC12细胞内mi R-181b-5p的表达,显著抑制SCC12细胞增殖,并且可将细胞周期阻滞于G1期,促进凋亡。Mi R-181b-5p可能成为人皮肤鳞状细胞癌诊断和治疗的新靶点。
【关键词】：羊痘 人类 临床特点 预防 miR-181b-5p 皮肤鳞状细胞癌 增殖 周期 凋亡
【学位授予单位】：大连医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R752
【目录】：

• 论文一 羊痘1例7-14
• 中文摘要7-8
• 英文摘要8-9
• 前言9
• 临床资料9-11
• 讨论11-12
• 结论12-13
• 参考文献13-14
• 论文二 miR-181b-5p抑制物对人皮肤鳞癌SCC12细胞增殖、 周期、凋亡、迁移和侵袭的影响14-40
• 中文摘要14-16
• 英文摘要16-18
• 前言18-20
• 研究材料和方法20-30
• 实验结果30-36
• 讨论36-38
• 参考文献38-40
• 综述40-50
• 参考文献45-50
• 致谢50-51

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本文编号：587664