湿疹患者外周血IL-22和AhR的表达及其临床意义
本文关键词：湿疹患者外周血IL-22和AhR的表达及其临床意义
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【摘要】：目的:湿疹是一种由各种因素综合作用下引起的炎症性皮肤病。研究发现,辅助性T细胞(T helper cells,Th)比例失衡及由此引发的相关的细胞因子表达量异常是湿疹发病的主要免疫学机制。检索国内外文献发现,白介素-22(interleukin22,IL-22)和芳香烃受体(Arylhydrocarbon Receptor,Ah R)作为Th22细胞重要的相关细胞因子在炎症性疾病和自身免疫性疾病中都发挥着重要作用。因此本课题旨在研究IL-22和Ah R在湿疹发病中的作用机理及二者的相关性。本实验初步探讨:1.IL-22 m RNA和Ah R m RNA在湿疹患者与正常人外周血中的表达差异;2.不同性别的湿疹患者外周血中IL-22 m RNA和Ah R m RNA的表达差异。3.IL-22 m RNA和Ah R m RNA在不同分型湿疹患者外周血中的表达量及其差异;4.对湿疹患者治疗2周、4周后检测患者外周血中IL-22 m RNA和Ah R m RNA表达量的变化;5.IL-22m RNA和Ah R m RNA表达量之间的相关性,从而探讨这两个因子在湿疹发病中的相互作用;6.IL-22 m RNA和Ah R m RNA在湿疹患者外周血中的表达量与湿疹皮损面积及严重度指数(Eczema area and severity index,EASI)的相关性。方法:本研究实验组来自就诊于天津市人民医院皮肤科门诊的湿疹患者,共60例,另健康对照组来自天津医科大学总医院同期健康体检者40例。采用实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time Fluorescence Quantitative Reverse Transcription Polymerase Chain Reaction,RT-PCR)方法对60例湿疹患者和40例健康者外周血中IL-22 m RNA和Ah R m RNA的表达量进行检测,按照EASI评分标准对60例湿疹患者皮损面积及严重度进行评分。利用统计学软件SPSS17.0处理实验数据,以P0.05或P0.01有统计学意义。结果:1.湿疹患者外周血中IL-22、Ah R m RNA的表达量明显高于健康对照组(IL-22"緾T值分别为:2.57±0.53,5.91±0.78;Ah R"緾T值分别为:2.87±0.50,6.53±0.78),差异均有统计学意义(P㩳0.01)。2.不同性别的湿疹患者外周血中IL-22、Ah R m RNA的表达无明显差异(P0.05)。3.急性期组、亚急性期组、慢性期组湿疹患者外周血中IL-22 m RNA和Ah R m RNA的表达量依次递增(IL-22的"緾T值分别为:2.79±0.47,2.63±0.49,2.28±0.51;Ah R"緾T值分别为:3.05±0.51,2.99±0.47,2.58±0.38),慢性期组分别与急性期组和亚急性期组比较差异有统计学意义(P㩳0.05),但急性期组与亚急性期组比较无差异(P0.05)。4.湿疹患者治疗2周后外周血中IL-22、Ah R m RNA的表达量较治疗前明显下降(IL-22"緾T值分别为:3.77±0.58,2.61±0.55;Ah R"緾T值分别为:4.46±0.81,2.91±0.50),湿疹患者治疗4周后与治疗2周时相比较外周血中IL-22、Ah Rm RNA的表达量明显下降(IL-22"緾T值分别为:5.05±0.79,3.78±0.62;Ah R"緾T值分别为5.66±0.95,4.46±0.84),差异均有统计学意义(P㩳0.01)。5.湿疹患者外周血中IL-22m RNA与Ah R m RNA的表达量呈正相关性且具有统计学意义(r=0.433,P=0.001)。湿疹患者外周血中IL-22 m RNA和Ah R m RNA的表达量与EASI评分之间呈正相关(IL-22"緾T值与EASI评分:r=-0.302,P=0.019,结果有统计学意义;Ah R"緾T值与EASI评分:r=-0.117,P=0.374,结果无统计学意义)。结论:1.湿疹患者外周血中IL-22m RNA和Ah R m RNA表达量均显著高于健康对照组,且IL-22m RNA的表达量与EASI评分之间呈正相关,说明IL-22和Ah R参与了湿疹的发生发展,并且IL-22可以作为评价湿疹患者严重程度的指标。2.经治疗2周、4周后湿疹患者IL-22m RNA和Ah R m RNA表达量明显降低,说明IL-22和Ah R参与了湿疹的致病过程。IL-22和Ah R是Th22细胞重要的相关细胞因子,由此推测Th22细胞在湿疹的发生发展中也起到了重要的作用。
【关键词】：湿疹 白介素-22 芳香烃受体 Th22细胞 EASI评分
【学位授予单位】：天津医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R758.23
【目录】：
- 中文摘要4-6
- Abstract6-11
- 缩略语11-13
- 前言13-15
- 研究现状、成果13-14
- 研究目的、方法14-15
- 对象和方法15-28
- 1.1 病例来源15
- 1.2 健康对照组15
- 1.3 诊断标准15-16
- 1.4 排除标准16
- 1.5 观察指标16-17
- 1.5.1 EASI评分16-17
- 1.5.2 湿疹患者生活质量指标调查17
- 1.6 主要试剂17-19
- 1.7 实验器材19
- 1.8 试剂的配置19-20
- 1.9 实验器具的处理和准备20-21
- 1.10 实验仪器21
- 1.11 实验方法和步骤21-26
- 1.11.1 样本处理21-22
- 1.11.2 超净工作台消毒22
- 1.11.3 全血总RNA的提取22-23
- 1.11.4 总RNA的测定23-24
- 1.11.5 逆转录反应24
- 1.11.6 SYBR Green I实时荧光定量PCR24-25
- 1.11.7 PCR产物电泳25-26
- 1.12 临床及实验室检查26
- 1.13 治疗方法26
- 1.14 统计学方法26-28
- 结果28-36
- 2.1 总RNA纯度检测28
- 2.2 总RNA完整性检测28
- 2.3 GAPDH、IL-22、AhR扩增产物的鉴定28-32
- 2.3.1 GAPDH、IL-22、AhR的PCR产物28
- 2.3.2 基因的相对定量方法及分析28
- 2.3.3 扩增产物特异性检测28-32
- 2.4 湿疹患者IL-22和AhR相对表达量及与部分指标相关性分析32-36
- 讨论36-46
- 3.1 Th1/Th2、Th17、Th22细胞与湿疹36-38
- 3.2 IL-22在湿疹发病中的作用机制38-41
- 3.3 AhR在湿疹发病中的作用机制41-43
- 3.4 IL-22、AhR与湿疹43-46
- 结论46-47
- 参考文献47-54
- 发表论文和参加科研情况说明54-55
- 综述 Th22细胞及其细胞因子IL-22在炎症免疫性疾病中的研究进展55-70
- 综述参考文献63-70
- 致谢70-71
- 个人简历71
【参考文献】
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，本文编号：683237
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