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腺病毒介导的PKCδ基因对皮肤鳞癌细胞抑制作用的实验研究

发布时间:2017-08-19 20:24

  本文关键词:腺病毒介导的PKCδ基因对皮肤鳞癌细胞抑制作用的实验研究


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【摘要】:目的:本实验研究通过应用腺病毒载体将PKCδ(protein kinase Cδ,蛋白激酶Cδ)感染到鳞癌细胞系SCC13细胞,,观察PKCδ对SCC13细胞增殖的影响,并利用NOD/SCID小鼠评价其体内成瘤能力,探讨PKCδ在皮肤鳞状细胞癌中的作用机制及意义。 方法:1.以腺病毒载体介导PKCδ感染到SCC13细胞中,通过Western blot检测PKCδ的表达情况;用~3H-胸腺嘧啶核苷(3H-TdR)掺入法检测PKCδ对SCC13细胞增殖的抑制作用。 2.将NOD/SCID小鼠随机分为腺病毒载体介导PKCδ感染的SCC13组和LacZ感染的SCC13对照组2组,将2组细胞分别植入NOD/SCID小鼠皮下,对比观察小鼠体内成瘤能力及直径大小,行HE染色光镜下观察瘤体的组织形态。 结果:1.成功感染Ad-PKCδ的SCC13细胞增殖明显抑制,与LacZ对照组相比具有统计学意义(P0.05)。 2.腺病毒介导PKCδ感染的SCC13细胞组和LacZ对照组中的小鼠均有体内瘤形成,接种成功,成瘤率为100%。定期测量各组小鼠肿瘤直径,Ad-PKCδ组的小鼠成瘤直径小于LacZ对照组的瘤体直径(P0.05)。 结论:通过腺病毒介导的PKCδ感染到SCC13细胞后,发现SCC13细胞的增殖受到抑制,移植到NOD/SCID小鼠后,可在小鼠体内成瘤,对肿瘤细胞生长增殖有抑制作用,为PKCδ基因治疗人皮肤鳞癌提供可能的治疗思路和手段。
【关键词】:腺病毒载体 皮肤鳞状细胞癌 PKCδ基因
【学位授予单位】:大连医科大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2013
【分类号】:R739.5
【目录】:
  • 摘要7-8
  • Abstract8-9
  • 前言9-10
  • 材料和方法10-18
  • 1.材料10
  • 2.主要试剂10
  • 3.主要仪器10-11
  • 4.实验方法11-18
  • 4.1 试剂的配制11
  • 4.2 细胞培养11
  • 4.3 细胞感染11-12
  • 4.4 免疫印迹(Western-blot)12-15
  • 4.5 3H-胸腺嘧啶核苷(3H-TdR)掺入法15-16
  • 4.6 NOD/SCID 小鼠的饲养16
  • 4.7 小鼠体内成瘤16
  • 4.8 小鼠体内瘤体的组织学观察16-17
  • 4.9 统计学处理17-18
  • 4.10 制图软件处理18
  • 结果18-21
  • 1.细胞感染后外源性 PKCδ基因的表达18
  • 2.Ad-PKCδ感染后肿瘤细胞增殖的变化18-19
  • 3.PKCδ对 NOD/SCID 小鼠体内成瘤的观察19-21
  • 讨论21-25
  • 结论25-26
  • 参考文献26-29
  • 综述29-42
  • 参考文献35-42
  • 附录42-43
  • 致谢43-44

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前3条

1 艾勇;常见非黑素瘤性皮肤癌的外科治疗进展[J];中国美容医学;2004年01期

2 秦至臻;戚欣;李静;;蛋白激酶C分子的成熟与活化[J];现代生物医学进展;2011年15期

3 韦芳,黄倩;腺病毒载体研究进展与展望[J];肿瘤;2005年05期



本文编号:702803

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