尖锐湿疣HPV感染分型及凋亡相关蛋白研究

发布时间：2017-09-08 01:14

  本文关键词：尖锐湿疣HPV感染分型及凋亡相关蛋白研究

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【摘要】：目的:尖锐湿疣(Condyloma Acuminatum,CA)是由乳多空病毒科的乳头瘤空泡病毒(human papillomavirus,HPV)A属感染引起的疣状增生性损害,发病率居于所有性病的首位,并且与宫颈癌、阴茎癌等浸润性癌密切相关。人乳头瘤病毒已经被人们发现的有100多种,与生殖道感染相关的有30多种,并依据其致癌性将其分为高危组别和低危组别。尖锐湿疣的典型病理改变为角化过度、角化不全,表皮棘层增厚,真皮浅层血管增生、扩张,血管周围淋巴细胞浸润,棘层上方和颗粒层出现空泡化细胞,出现这些改变与异常的细胞凋亡存在密切关系,Caspase凋亡信号通路是凋亡通路最经典的途径,Survivin被认为是凋亡抑制蛋白家族(Inhibitor of apoptosis proteins,IAPs)中迄今为止发现抑制凋亡最强的蛋白。Caspase家族中,Caspase-8是信号通路的启动子,而Caspase-3则是信号通路的最终执行者,二者的相互作用完成细胞的凋亡,而Survivin主要作用于终末的Caspase-3,阻碍Caspase-3与其底物结合,从而发挥其抗凋亡的作用。Caspase和Survivin凋亡基因在尖锐湿疣中的表达尽管已有学者研究证实其Caspase表达下调和Survivin表达上调,但是Caspase和Survivin凋亡基因与尖锐湿疣分型之间的关系尚未见报道,因此本研究采用流式荧光杂交法对尖锐湿疣皮损进行HPVDNA阳性型别的检测,进一步探讨尖锐湿疣患者所感染的HPV基因型和阳性率,分析HPV分型在年龄、性别、职业、疣体大小、表面情况的分布特点。采用免疫组化技术检测Caspase-3、Caspase-8、Survivin在不同分型的尖锐湿疣组织中的表达情况,进一步探讨尖锐湿疣进展为侵袭性癌的可能机制。方法:1.研究对象及蜡块来源:收集2015年1月到2015年12月在河北省承德市承德医学院附属医院皮肤性病科就诊的患者80例,根据相应的病理诊断确诊为尖锐湿疣,以及正常皮肤组织蜡块10例。2.收集患者的临床资料,包括年龄、性别、职业、部位、表面情况、大小,采用流式荧光杂交法对尖锐湿疣皮损进行HPVDNA阳性型别的检测。3.实验分组:选取正常的皮肤组作为阴性对照组,实验组分为尖锐湿疣低危组和高危组。4.采用maxvisiontm免疫组织化学技术检测各组caspase-3、caspase-8、survivin蛋白的表达情况。5.数据统计分析:应用spss19.0统计学软件对数据进行统计分析,计数资料采用χ2检验,计量资料采用中位数±四分位数间距(m±qd)表示,各指标间比较采用非参数检验(秩和检验),率的比较采用χ2检验以及fisher确切概率法。p0.05为差异有统计学意义。结果:1.全部80例ca中,70例hpv阳性,阳性率为87.50%,低危型感染有66例(94.29%),高危型感染24例(34.29%),高危、低危混合感染20例(28.57%);其中hpv6型感染为38例,hpv11型感染为35例,hpv6型和hpv11型混合感染12例。hpv6型hpv11型感染占主要感染比例。2.在40例hpvdna阳性的男性患者中,低危型感染的男性有25例(62.50%),感染高危型的男性15例(37.50%),在30例hpvdna阳性的女性患者中,低危型感染的女性21例(70.00%),感染高危型的女性9例(30.00%)。hpv分型与性别无明显的相关性(p0.05)。3.小于等于25岁的22名hpvdna阳性的患者中,低危型感染的有14例(63.64%),感染高危型的有8例(36.36%);26到40岁的34名hpvdna阳性的患者中,低危型感染有23例(67.65%),感染高危型有11例(32.35%);大于40岁的14名hpvdna阳性的患者中,低危型感染的有9例(64.29%),感染高危型有5例(25.71%)。hpv分型与年龄无明显的相关性(p0.05)。4.表面情况干燥的36例hpvdna阳性的患者中,低危型感染的25例(69.45%),感染高危型的11例(30.55%);表面情况湿润的34例患者中,感染低危型的21例(61.76%),感染高危型的13例(38.24%)。hpv分型与表面情况无明显的相关性(p0.05)。5.职业为农民的29例hpvdna阳性的患者中,低危型感染的有20例(68.97%),感染高危型的有9例(31.03%);职业为工人的12例hpvdna阳性的患者中,低危型感染的有6例(50.00%),感染高危型的有6例(50.00%);职业为个体的11例hpvdna阳性的患者中,低危型感染的有8例(72.73%),感染高危型的有3例(27.27%);职业为其他的18例hpvdna阳性的患者中,低危型感染的有12例(66.67%),感染高危型的有6例(33.33%)。hpv分型与职业无明显的相关性(p0.05)。6.hpv型别与疣体大小的关系:70例hpvdna阳性的患者中,低危型感染有46例(65.71%),中位数±四分位数间距为0.08±0.33cm3;感染高危型有24例(34.29%),中位数±四分位数间距为0.01±0.01cm3;hpv分型与疣体体积大小具有相关性(p0.05)。7.尖锐湿疣低危组、高危组与正常皮肤组织中caspase-3阳性细胞的表达:caspase-3为细胞胞浆着色,以棕黄色染色为阳性表达。免疫组化检测低危组、高危组与正常皮肤组织中均可见caspase-3阳性表达。caspase-3阳性细胞数百分比(%)在低危组为0.40±0.29,在高危组为0.21±0.16,与正常对照组的0.80±0.21相比,明显降低,差异显著(p0.001)。低危组30例患者,阳性表达例数为13例,阳性表达率为43.33%(13/30),其中弱阳性2例,阳性表达率6.67%(2/30);中度阳性4例,阳性表达率为13.33%(4/30);强阳性7例,阳性表达率为23.34%(7/30)。阴性表达17例,阴性表达率56.67%(17/30)。高危组30例患者,阳性表达例数为4例,阳性表达率为13.33%(4/30),其中弱阳性1例,阳性表达率3.33%(1/30);中度阳性3例,阳性表达率为10.00%(3/30);强阳性0例,阳性表达率为0.00%(0/30)。阴性表达26例,阴性表达率86.67%(26/30)。正常组10例,阳性表达例数为9例,阳性表达率为90.00%(9/10),其中弱阳性0例,阳性表达率0.00%(0/10);中度阳性1例,阳性表达率为10.00%(1/10);强阳性8例,阳性表达率为80.00%(8/10)。尖锐湿疣低危组、高危组与正常对照组相比,caspase-3阳性表达率明显降低,差异有统计学意义(p0.001)。8.尖锐湿疣低危组、高危组与正常皮肤组织中caspase-8阳性细胞的表达:caspase-8为细胞胞浆着色,以棕黄色染色为阳性表达。免疫组化检测低危组、高危组与正常皮肤组织中均可见caspase-8阳性表达。caspase-8阳性细胞数百分比(%)在低危组为0.37±0.30,在高危组为0.20±0.17,与正常对照组的0.80±0.20相比,明显降低,差异显著(p0.001)。低危组30例患者,阳性表达例数为12例,阳性表达率为40.00%(12/30),其中弱阳性2例,阳性表达率6.67%(2/30);中度阳性2例,阳性表达率为6.67%(2/30);强阳性8例,阳性表达率为26.67%(8/30)。阴性表达18例,阴性表达率60.00%(18/30)。高危组30例患者,阳性表达例数为3例,阳性表达率为10.00%(3/30),其中弱阳性1例,阳性表达率3.33%(1/30);中度阳性1例,阳性表达率为3.33%(1/30);强阳性1例,阳性表达率为3.33%(1/30)。阴性表达27例,阴性表达率90.00%(27/30)。正常组10例,阳性表达例数为9例,阳性表达率为90.00%(9/10),其中弱阳性0例,阳性表达率0.00%(0/10);中度阳性2例,阳性表达率为20.00%(2/10);强阳性7例,阳性表达率为70.00%(7/10)。尖锐湿疣低危组、高危组与正常对照组相比,caspase-8阳性表达率明显降低,差异有统计学意义(p0.001)。9.尖锐湿疣低危组、高危组与正常皮肤组织中survivin阳性细胞的表达:survivin为细胞胞浆着色,以棕黄色染色为阳性表达。免疫组化检测低危组、高危组中可见survivin阳性表达,正常皮肤组织中未见survivin的阳性表达。survivin阳性细胞数百分比(%)在低危组为0.35±0.28,在高危组为0.64±0.30,与正常对照组相比,明显升高,差异显著(p0.001)。低危组30例患者,阳性表达例数为13例,阳性表达率为43.33%(13/30),其中弱阳性6例,阳性表达率20.00%(6/30);中度阳性4例,阳性表达率为13.33%(4/30);强阳性3例,阳性表达率为10.00%(3/30)。阴性表达17例,阴性表达率56.67%(17/30)。高危组30例患者,阳性表达例数为23例,阳性表达率为76.67%(23/30),其中弱阳性2例,阳性表达率6.67%(2/30);中度阳性10例,阳性表达率为33.33%(10/30);强阳性11例,阳性表达率为36.67%(11/30)。阴性表达7例,阴性表达率23.33%(7/30)。正常组10例,阴性表达为10例(100.00%),无阳性表达。尖锐湿疣低危组、高危组与正常对照组相比,survivin阳性表达率明显升高,差异有统计学意义(p0.001)。结论:1.尖锐湿疣患者感染hpv不同型别与性别、年龄、职业、表面情况无明显相关性;高危组hpv感染的尖锐湿疣疣体体积小于低危组。2.尖锐湿疣caspase-3和caspase-8表达下调、survivin表达上调;高危型别感染的尖锐湿疣Caspase-3和Caspase-8表达下调明显、Survivin表达上调明显。
【关键词】：尖锐湿疣 人乳头瘤病毒 Caspase-3 Caspase-8 Survivin
【学位授予单位】：承德医学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R752.53
【目录】：

• 中文摘要5-10
• 英文摘要10-16
• 英文缩写16-17
• 前言17-18
• 材料与方法18-23
• 结果23-27
• 附图27-32
• 附表32-39
• 讨论39-45
• 结论45-46
• 参考文献46-50
• 综述50-64
• 参考文献59-64
• 致谢64-65
• 个人简历65

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前2条

1 ;Caspase Family Proteases and Apoptosis[J];Acta Biochimica et Biophysica Sinica;2005年11期

2 王靖华,陈龙邦,黄文斌,李桂圆,孟奎,管晓翔,王晨;survivin和caspase-3在非小细胞肺癌中的表达及其与肿瘤细胞凋亡的关系[J];中国肺癌杂志;2005年05期

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本文编号：811006