梅毒螺旋体大环内酯类抗生素耐药基因突变位点检测

发布时间：2017-09-08 22:11

  本文关键词：梅毒螺旋体大环内酯类抗生素耐药基因突变位点检测

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【摘要】：梅毒（syphilis）是一种慢性经典的性传播疾病，梅毒螺旋体（TreponemaPallidum，TP）是引起梅毒的病原体，其可侵犯全身各器官（全身皮肤黏膜、心血管、神经、骨骼等），，造成多系统损害，产生多种多样的症状和体征，梅毒也因此被称为“最大模仿者”。对于梅毒的治疗，青霉素是首选的治疗药物，但是在治疗上存在一些问题，如：青霉素过敏反应及肌肉注射引起疼痛和不便等，严重影响了青霉素应用的安全性和患者的依从性。鉴于青霉素治疗的局限性，人们一直在寻找既具有较好疗效，又方便服用的治疗药物。大环内酯类抗生素如阿奇霉素是近年来备受关注的药物，对梅毒螺旋体有杀伤活性，治疗早期及潜伏期梅毒有效，在组织中的半衰期较长，只需单剂量口服，并且可同时治疗其他性传播疾病（STD），因此大环内酯类抗生素被用于梅毒的预防及治疗。但近年来研究发现，梅毒螺旋体对大环内酯类抗生素出现了耐药，耐药基因定位于TP23SrRNA基因的2058或2059位由A突变为G（A2058G，A2059G）。之后多个国家和地区进行了大环内酯类抗生素耐药基因突变位点的检测，耐药率各不相同。迄今为止，山东地区未有梅毒螺旋体大环内酯类抗生素耐药突变位点检测的报道，因此本研究收集66例梅毒螺旋体DNA标本进行TP23SrRNA基因突变位点检测。 实验目的：1.检测山东地区TP菌株是否存在大环内酯类抗生素耐药基因（23SrRNA）突变位点；2.统计山东地区TP大环内酯类抗生素耐药率；3.评估山东地区大环内酯类抗生素能否作为治疗梅毒的替代药物 实验方法：收集疑似梅毒患者肛门及生殖器溃疡标本，提取TP DNA，经实时荧光定量PCR证实为梅毒螺旋体，然后进行23SrRNA基因目的片段的扩增，对PCR扩增产物进行纯化并直接目的片段测序进行序列分析，检测突变位点。 实验结果：本研究发现梅毒螺旋体大环内酯类抗生素耐药基因23SrRNA基因上的两个突变位点，且66份标本均含有突变位点（100%），61份标本测序含有A2058G突变，5份标本测序含有A2059G突变，其中A2059G为国内首次报道。 结论：首先，梅毒螺旋体大环内酯类抗生素耐药率在山东地区较高，因此大环内酯类抗生素不推荐作为梅毒治疗的替代药物。其次，两耐药突变位点的报道（A2059G在国内首次报道），表明了耐药菌株地理分布及菌株的多样性。
【关键词】：梅毒螺旋体 大环内酯类抗生素 23S rRNA基因 A2058G突变 A2059G突变
【学位授予单位】：济南大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2014
【分类号】：R759.1
【目录】：

• 导师简介5-7
• 摘要7-9
• ABSTRACT9-11
• 英文缩略词表11-12
• 第一章 前言12-16
• 第二章 实验材料与方法16-35
• 2.1 研究对象16
• 2.2 实验试剂16-18
• 2.3 实验相关器材18-20
• 2.4 分析软件20
• 2.5 实验方法20-35
• 第三章 结果35-37
• 3.1 病例资料（66 例梅毒患者）35-36
• 3.2 PCR 产物经琼脂糖凝胶电泳检测结果36
• 3.3 测序结果36-37
• 第四章 讨论37-40
• 第五章 结论40-41
• 参考文献41-43
• 附录43-47
• 综述47-53
• 参考文献51-53
• 攻读学位期间发表的学术论文53-54
• 在校期间所获奖励54-56
• 致谢56

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本文编号：816603