不同尿酸浓度对人骨髓间充质干细胞成神经分化的影响

发布时间：2017-04-02 21:05

  本文关键词：不同尿酸浓度对人骨髓间充质干细胞成神经分化的影响，，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的：观察不同尿酸浓度对人骨髓间充质干细胞(hBMSCs)成神经分化的影响。 方法：取健康成人的骨髓血,体外分离、纯化、培养hBMSCs,用倒置显微镜观察细胞形态,扩增3代的hBMSCs为研究对象,分为完全培养基组(完全培养基)、对照组(Ommol/L尿酸)和干预诱导组(0.2、0.4、0.8mmol/L尿酸),先用含不同浓度(0、0.2、0.4、0.8mmol/L)尿酸的成神经预诱导液诱导24小时,再用含不同浓度(0、0.2、0.4、0.8mmol/L)尿酸的成神经诱导液诱导,完全培养基组始终用完全培养基。1小时后行尼氏体染色,2小时后用免疫组织化学法检测细胞内巢蛋白(Nestin)、神经元特异性烯醇化酶(neuron specific enolase, NSE)、中分子量神经丝蛋白(neurofilament protein medium, NF-M)的表达。 结果：hBMSCs经诱导后,完全培养基组细胞始终呈长梭形,旋涡状排列,尼氏体染色阴性。对照组及干预诱导组细胞的胞体逐渐收缩,突起并与相邻细胞连成网状,尼氏体染色阳性,含不同浓度尿酸的诱导组NSE、NF-M阳性率均较对照组明显升高(P0.05),而且随着尿酸浓度增加,其阳性表达率均逐渐增加(P0.05)。含不同浓度尿酸的诱导组Nestin阳性表达率较对照组明显降低(P0.05),而且随着尿酸浓度增加,其阳性表达率逐渐降低(P0.05)。诱导4h后,可见细胞明显脱落。 结论：在一定条件下,尿酸能够促进hBMSCs向神经元样细胞的分化,并且具有一定的浓度依赖性。
【关键词】：人骨髓间充质干细胞 细胞分化 神经元 尿酸
【学位授予单位】：青岛大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2014
【分类号】：R329.2
【目录】：

• 摘要2-3
• Abstract3-5
• 引言5-6
• 第—章 材料与方法6-11
• 1.1 实验试剂6
• 1.2 实验仪器与耗材6-7
• 1.3 液体配制7-8
• 1.4 实验步骤8-11
• 第二章 统计分析11-12
• 第三章 结果12-19
• 3.1 hBMSCs培养的形态学变化12
• 3.2 hBMSCs向神经样细胞分化的形态学观察12-13
• 3.3 尼氏体染色13-14
• 3.4 免疫组织化学检测细胞内NSE表达结果14-15
• 3.5 免疫组织化学检测细胞内Nestin表达结果15-16
• 3.6 免疫组织化学检测细胞内NF-M表达结果16-19
• 第四章 讨论19-21
• 结论21-22
• 参考文献22-25
• 综述25-36
• 综述参考文献32-36
• 攻读学位期间的研究工作36-37
• 致谢37-38

【参考文献】

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1 周燕;陈奎生;高剑波;韩瑞;鲁晶晶;彭涛;贾延R

本文编号：283137