小鼠肺组织内造血干细胞分离、纯化与诱导分化为树突细胞的实验研究

发布时间：2022-12-06 20:44

　　目的:探索小鼠肺组织内造血干细胞分离、纯化与诱导分化为树突细胞（dendriric cell,DC）的方法,为小鼠肺组织内造血干细胞的相关研究提供理论基础和实验方法。方法:4只雄性C57小鼠肺组织经I型胶原酶、I型DNA酶和淋巴细胞分离液消化、分离、纯化为单个核细胞,采用流式细胞仪鉴定和分选Lin^-Sca-1⁺c-Kit⁺细胞即造血干细胞（HSC）。向所获得的HSC加入干细胞因子（SCF）和白介素（IL）-3促进细胞增殖。停用SCF和IL-3后,加入粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子（GM-CSF）和IL-4将HSC诱导分化为DC,加入脂多糖（LPS）促细胞成熟。倒置显微镜下观察DC形态,流式细胞术分析DC细胞表面分子CD11c、MHC-II、CD80和CD86的表达,酶联免疫吸附技术（ELISA）检测IL-12表达水平。结果:从流式细胞仪分选鉴定的4只小鼠肺组织单个核细胞中,共收集HSC2419. 67±247. 59个,纯度7. 16%±0. 43%。HSC经SCF和IL-3诱导7 d后扩增62. 34±3. 23倍;诱导... 

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【参考文献】：
期刊论文
[1]肺组织修复中肺内外干细胞的作用、功能及问题[J]. 陈艳,刘弦.  中国组织工程研究. 2018(33)
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[3]树突状细胞参与免疫调节的相关受体及其介导的信号转导通路研究进展[J]. 盛康亮,张玲玲,魏伟.  细胞与分子免疫学杂志. 2013(09)
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本文编号：3711603