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肝脏NK细胞的特性研究

发布时间:2023-03-12 00:39
  自然杀伤细胞(natural killer cells, NK cell)是天然免疫系统的重要组成细胞。与T、B细胞不同,NK细胞无需致敏就可对肿瘤和病毒感染的靶细胞产生快速应答,主要通过直接杀伤和分泌多种细胞因子的方式来发挥其效应功能,是机体抵御外来病原体入侵的第一线细胞。近年来越来越多的研究表明,NK细胞并不是单一表型和功能的细胞,而是异质性的细胞群体。NK细胞在人类和小鼠中的异质性和相应的分类均有报道。在小鼠中,根据NK细胞的组织分布特点或不同发育成熟阶段,NK细胞被划分成表型和功能迥异的各种亚群。对NK细胞的细化分类研究,不仅有利于了解NK细胞的基本生物学特性,更重要的是,对临床NK细胞的治疗也有着深远意义。 肝脏是机体重要的免疫器官。它独具特色的血液供应机制和生理结构,一方面需要肝脏免疫系统进行精细调节才能维持稳态,另一方面也造就了肝脏的免疫优势状态。肝脏的天然免疫优势状态主要体现在肝脏含有种类丰富和数量庞大的天然免疫细胞,其中,作为天然免疫系统成员的NK细胞就富集于肝脏中。不仅如此,肝脏NK细胞的表型也十分特殊,一群表型不成熟的NK细胞始终在肝脏以高比例的形式存在,而在外周...

【文章页数】:109 页

【学位级别】:博士

【文章目录】:
摘要
ABSTRACT
目录
表序
图序
符号说明
第1章 绪论(NK细胞的异质性及肝脏NK细胞的特殊性)
    1.1 前言
    1.2 NK细胞的表型和功能特点
        1.2.1 NK细胞的标志
        1.2.2 NK细胞的发育
        1.2.3 NK细胞的功能
        1.2.4 NK细胞亚群及其组织分布特性
    1.3 肝脏微环境的特殊性
        1.3.1 肝脏的生理结构
        1.3.2 肝脏中的细胞群体
    1.4 肝脏NK细胞的特点
        1.4.1 肝脏NK细胞的表型和功能
        1.4.2 肝脏NK细胞与肝脏其它细胞的相互作用
        1.4.3 肝脏NK细胞与病毒感染
    1.5 结语
第2章 引言
    2.1 肝脏特有NK细胞亚群的研究
    2.2 病毒感染过程中肝脏NK细胞的变化研究
第3章 材料与方法
    3.1 实验材料
        3.1.1 实验动物
        3.1.2 小鼠细胞分离相关试剂和材料
        3.1.3 细胞培养相关试剂和材料
        3.1.4 细胞株
        3.1.5 Poly Ⅰ:C
        3.1.6 病毒
        3.1.7 阻断抗体
        3.1.8 流式细胞术所用抗体
        3.1.9 流式胞内染色相关试剂
        3.1.10 CHS模型相关试剂
        3.1.11 粘附实验相关试剂
        3.1.12 基因组抽提试剂
        3.1.13 PCR试剂
    3.2 实验仪器
    3.3 实验方法
        3.3.1 肝脏单个核细胞分离
        3.3.2 脾细胞分离
        3.3.3 骨髓细胞分离
        3.3.4 外周血单个核细胞分离
        3.3.5 淋巴结细胞分离
        3.3.6 YAC-1细胞培养
        3.3.7 细胞计数
        3.3.8 流式细胞术检测细胞表面标志
        3.3.9 流式细胞术检测胞内因子
        3.3.10 细胞转输
        3.3.11 FITC致敏
        3.3.12 粘附实验
        3.3.13 CD49a体内阻断实验
        3.3.14 Poly Ⅰ:C注射
        3.3.15 腺病毒感染
        3.3.16 小鼠基因组抽提
        3.3.17 小鼠基因型鉴定
        3.3.18 统计学分析
第4章 结果与讨论
    4.1 肝脏特有NK细胞亚群的特性研究
        4.1.1 小鼠肝脏存在高比例的DX5-NK细胞
        4.1.2 肝脏DX5-NK细胞与其它NK细胞亚群具有显著差异
        4.1.3 肝脏特有DX5-NK细胞的迁移和发育特性
        4.1.4 CD49a作为肝脏特有DX5-NK细胞的特异性标志
        4.1.5 肝脏特有NK细胞的特殊功能
        4.1.6 讨论及总结
    4.2 病毒感染过程中CD62L参与NK细胞在肝脏的聚集和成熟
        4.2.1 CD62L在静息NK细胞上的表达特性
        4.2.2 Poly Ⅰ:C引起肝脏NK细胞变化
        4.2.3 Poly Ⅰ:C引起肝脏NK细胞的变化依赖于CD62L
        4.2.4 CD62L的阻断抑制腺病毒引起的肝脏NK细胞变化
        4.2.5 讨论及总结
参考文献
致谢
攻读博士学位期间的主要研究成果
    论文发表
    学术会议
    获得奖励



本文编号:3760579

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