类鼻疽杆菌通过抑制自噬调控HepG2细胞胞内脂质代谢

发布时间：2023-04-09 19:50

　　目的探讨类鼻疽杆菌感染HepG2细胞后诱导的自噬抑制对胞内脂质代谢的调控作用。方法类鼻疽杆菌感染HepG2细胞6、12、24 h为感染组,以未感染组作为对照。激光共聚焦显微镜观测各组细胞内脂滴和GFP-自噬点的数量;定量试剂盒检测各组细胞内甘油三酯及胆固醇水平;Western blot检测各组细胞中自噬相关蛋白LC3Ⅱ、p62表达水平。利用自噬抑制剂3-MA、Baf-A1以及自噬激活剂Rapa处理细胞,检测改变宿主细胞自噬水平后,对类鼻疽杆菌感染HepG2细胞后胞内脂质代谢的影响;外源加入游离脂肪酸三醋酸甘油酯,通过细菌胞内计数实验检测类鼻疽杆菌胞内存活情况。结果类鼻疽杆菌感染HepG2细胞6、12、24 h后,与未感染组比较,胞内脂滴数量增多,脂质成分甘油三酯和胆固醇水平也随感染时间延长逐渐升高,且在感染24 h后达到最高水平(P<0.01);自噬检测发现,与未感染组比较,LC3Ⅱ蛋白表达随感染时间逐渐下降,p62蛋白表达水平随感染时间逐渐蓄积,胞内自噬小体的数量也随感染时间逐渐减少,且感染24 h后数量最低(P<0.01),提示类鼻疽杆菌感染HepG2细胞后自噬受抑;使...

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【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 质粒、菌株及细胞系
    1.2 主要试剂
    1.3 细胞培养及类鼻疽杆菌感染
    1.4 Western blot检测
    1.5 激光共聚焦观察
    1.6 定量试剂盒检测细胞内甘油三酯及胆固醇水平
    1.7 细菌胞内增殖实验
    1.8 统计学分析
2 结果
    2.1 类鼻疽杆菌感染HepG2细胞后导致宿主细胞脂质蓄积
    2.2 类鼻疽杆菌感染HepG2细胞后宿主细胞自噬受抑
    2.3 激活自噬促进宿主细胞脂质代谢
    2.4 激活宿主脂质代谢有利于类鼻疽杆菌的清除
3 讨论



本文编号：3787630