ATP合酶在糖尿病大鼠阴茎海绵体平滑肌细胞病变中的作用机制

发布时间：2023-08-30 01:01

　　目的探讨三磷酸腺苷(ATP)合酶在糖尿病大鼠阴茎海绵体平滑肌细胞病变中的作用机制。方法体内实验:40只SD大鼠随机分为正常对照组与糖尿病组(按60mg/kg腹腔内注射链脲佐菌素后72h、1周、2周随机血糖水平>16.7mmol/L为造模成功),饲养10周后比较大鼠阴茎勃起功能;处死后取阴茎海绵体组织,采用胶原纤维染色法检测纤维化程度,免疫组化法检测Caspase-3表达,Western blot法检测F1-ATPase蛋白表达。体外实验:取正常大鼠阴茎海绵体平滑肌细胞进行细胞培养,分为对照组(正常培养基培养)、高糖组(含30mmol/L葡萄糖的培养基培养)、高糖+ATP酶过表达组(ATPase高表达质粒转染阴茎海绵体平滑肌细胞24h后,再用含30mmol/L葡萄糖的培养基培养)。48h后采用Western blot法检测F1-ATPase、转化生长因子β₁(TGF-β₁)、结缔组织生长因子(CTGF)蛋白表达。结果在体内实验中,与正常对照组比较,糖尿病组30min内阴茎勃起次数明显减少(P<0.05),阴茎海绵体胶原纤维/肌纤维比...

【文章页数】：6 页

【文章目录】：
1 材料和方法
    1.1 体内试验
        1.1.1 动物及试剂
        1.1.2动物分组及模型制备
        1.1.3 阴茎勃起功能检测
        1.1.4 大鼠阴茎组织获取及处死
        1.1.5 阴茎海绵体组织纤维化观察
        1.1.6 阴茎海绵体F1-ATPase蛋白表达水平检测
        1.1.7 阴茎海绵体平滑肌细胞凋亡检测
    1.2 体外试验
        1.2.1 主要试剂
        1.2.2 细胞分离、培养及转染
        1.2.3 F1-ATPase、TGF-β1和CTGF蛋白表达水平检测
    1.3 统计学处理
2 结果
    2.1 糖尿病组与正常对照组大鼠体重及血糖浓度比较
    2.2 糖尿病组与正常对照组大鼠阴茎勃起功能比较
    2.3 糖尿病组与正常对照组大鼠阴茎海绵体纤维化比较
    2.4 糖尿病组与正常对照组大鼠阴茎海绵体Caspase-3阳性的平滑肌细胞比例比较
    2.5 体内外实验观察细胞内F1-ATPase蛋白表达变化
    2.6 体外实验观察TGF-β1通路上蛋白表达变化
3 讨论



本文编号：3844626