先天性静脉畸形骨肥大综合征和长QT综合征的分子遗传学研究

发布时间：2023-10-12 01:05

　　心血管疾病是最重要的人类疾病之一,在欧美发达国家和中国都是导致人类 死亡的的头号杀手。对心血管疾病的分子遗传学研究,不仅可提供精确的诊断方 法,发展新的有效的治疗手段,同时还有助于我们理解心脏工作和血管发育的机 理。在本研究中,我们克隆了一个新的血管生成因子,VG5Q, 其突变可引起先天 性静脉畸形骨肥大综合征(Klippel-Trenaunay Syndrome,以下简称 KTS);在一 个大的长 QT 家系中,我们发现了一个新的 KCNQ1 基因的突变,L187P, 该突变引 起这一家庭的部分成员患有呈常染色体显性遗传的长 QT 综合征。 KTS 是一类先天性血管疾病,其症状是毛细血管、静脉管、淋巴管畸形,以及 骨和软组织肥大,可影响到身体的许多部位,出现疼痛、残疾和畸形,给病人带来 极大的痛苦和精神压力。KTS通常散发,其发病原因尚不清楚。 本文通过定位克隆的方法克隆了一个新基因 VG5Q,并研究了该基因在血管生成 过程中的生理功能。我们在一位发生了 t(5;11)(q13.3;p15.1)平衡易位的 KTS 病人身 上分离淋巴细胞,通过体细胞杂交,获得了含衍生 5 号染色体...

【文章页数】：99 页

【学位级别】：博士

【文章目录】：
中文摘要
英文摘要
第一部分 VG5Q,一个新的血管生成因子,突变引起KTS
    前言
    材料和方法
        一、 技术路线和实验方案
        二、 实验材料和方法
            1 KTS病人与临床诊断
            2 DNA的提取
            3 建立人鼠杂种体细胞株
            4 应用公用数据库中的STS作为探针,对断裂点初步定位
            5 应用Celera数据库中已知序列,设计STS对断裂点进行精确定位
            6 克隆两个易位接合序列
            7 克隆全长VG5QcDNA
            8 VG5Q的组织分布和内皮细胞的表达
            9130 个KTS病人VG5Q基因的突变检测
            10 构建VG5QPromoter-Luc+载体及chr11-5-Luc+载体
            11 Luciferase检测
            12 野生型和突变型VE5G表达载体的构建与表达
            13 鸡胚的绒毛膜囊CAM检测
    结果
        1 衍生5号染色体和衍生11号染色体的杂种细胞株的获得
        2 易位断裂点的确定
        3 两个易位接合区域的精确克隆
        4 T（5;11）易位断裂愈合的可能机制
        5 新基因VG5Q,KTS候选基因
        6 T（5;11）易位与VG5Q
        75 个KTS病人的VG5Q具有的E133K突变
        8 染色体的平衡易位引起VG5Q的表达增强
        9 VG5Q是一个血管生成因子,E133K是一种功能增强型突变
    讨论
    参考文献
第二部分 新的KCNQ1突变,L187P,引起长QT综合症
    前言
    材料与方法
        1 家系材料
        2 DNA提取
        3 连锁分析
        4 测序
        5 SSCP检测
        6 RFLP分析
    结果
        1 两个LQT家系genotype结果
        2 LodScore的计算
        3 KCNQ1第三外显子发生L187P替换
        4 L187P与疾病共分离
        5 RFLP分析结果表明L187P是引起家系2患LQT的致病突变
    讨论
    参考文献
附录:博士期间发表的论文
致谢



本文编号：3853143