在小鼠模型中研究衰老对表皮朗格汉斯细胞发育和功能的影响

发布时间：2023-12-23 20:28

　　免疫老化是随着年龄增长机体免疫功能逐渐衰退的过程，老年皮肤可能由于新陈代谢的减慢及免疫系统功能的异常，更易引发感染、自身免疫病及皮肤肿瘤。朗格汉斯细胞（Langerhans cell, LC）是定居于皮肤的树突状细胞（Dendritic cell, DC）亚群，是皮肤免疫反应中重要的抗原提呈细胞（Antigen presenting cell,APC），在调控皮肤免疫应答中起着非常关键的作用。LC独特的标志是胞质中含有一种网球拍型小颗粒，称为伯贝克颗粒（Birbeck granule），它参与抗原的捕获和处理。摄取抗原后的LC迁至淋巴结，将抗原呈递给T细胞，引发皮肤免疫反应，从而在对抵抗侵入皮肤的病原微生物、监视皮肤癌变细胞中发挥重要作用。随着衰老与皮肤免疫间关系研究的深入，衰老过程中LC发育和功能的变化也日益受到重视。 转化生长因子β（transforming growth factorβ,TGFβ）是一类功能复杂的多肽类细胞因子超家族，Smad蛋白是TGFβ受体复合物下游的信号调节分子，可将活化信号由胞膜传导至胞核而调节转录过程。TGFβ/Smad信号转导通路是TGFβ发挥生物学作...

【文章页数】：102 页

【学位级别】：博士

【文章目录】：
符号说明
中文摘要
Abstract
1 前言
    1.1 表皮朗格汉斯细胞特性、发育和功能
        1.1.1 朗格汉斯细胞形态和起源
        1.1.2 朗格汉斯细胞的发育和内稳
        1.1.3 朗格汉斯细胞功能
    1.2 衰老对免疫细胞的影响
    1.3 miRNA 对机体免疫系统功能的调控作用
        1.3.1 miRNA 的生物来源和生物合成
        1.3.2 miRNA 对免疫细胞分化发育的调控
        1.3.3 miRNA 对免疫功能的调控作用
    1.4 衰老与 miRNA 表达变化的关系
2 材料与方法
    2.1 材料
        2.1.1 实验动物
        2.1.2 试剂和试剂盒
        2.1.3 主要仪器
        2.1.4 溶液及配置
    2.2 方法
        2.2.1 表皮单细胞悬液的制备
        2.2.2 朗格汉斯细胞表型测定
        2.2.3 朗格汉斯细胞吞噬抗原能力
        2.2.4 表皮朗格汉斯细胞迁移能力试验
        2.2.5 朗格汉斯细胞刺激抗原肽特异性 T 细胞增殖反应
        2.2.6 耳朵皮片免疫荧光染色
        2.2.7 朗格汉斯细胞 miRNA 提取
        2.2.8 RNA 富集浓缩
        2.2.9 逆转录、预扩增及实时定量检测
        2.2.10 数据处理与分析
3 结果与分析
    3.1 朗格汉斯细胞发育的信号通路
        3.1.1 Smad3 对表皮朗格汉斯细胞发育的影响
        3.1.2 Smad3 对表皮朗格汉斯细胞表型的影响
        3.1.3 Smad3 对表皮朗格汉斯细胞吞噬抗原能力的影响
    3.2 衰老对表皮朗格汉斯细胞发育和功能的影响
        3.2.1 衰老对表皮朗格汉斯细胞发育的影响
        3.2.2 衰老对表皮朗格汉斯细胞成熟的影响
        3.2.3 衰老对表皮朗格汉斯细胞吞噬抗原能力的影响
        3.2.4 衰老对表皮 LC 体内迁移能力的影响
        3.2.5 衰老对表皮 LC 功能的影响
    3.3 衰老过程中 miRNA 表达与表皮朗格汉斯细胞功能变化的关系
        3.3.1 分选表皮朗格汉斯细胞及 miRNA 检测
        3.3.2 差异表达的 miRNAs
        3.3.3 单个实时定量确证实验
        3.3.4 老龄小鼠中差异表达的 miRNAs 与朗格汉斯细胞功能的关系
4 讨论
    4.1 表皮朗格汉斯细胞发育的信号通路
    4.2 表皮朗格汉斯细胞的功能
    4.3 衰老与表皮朗格汉斯细胞功能变化的关系
    4.4 衰老与 miRNA 表达谱的关系
    4.5 miRNA 对树突状细胞分化发育及功能的调控作用
    4.6 老年朗格汉斯细胞功能变化与 miRNA 表达的关系
结论
参考文献
攻读学位期间发表论文
致谢



本文编号：3874262