运用裸鼠动物模型筛选胃癌转移相关蛋白和基因

发布时间：2024-01-29 11:45

　　目的： 通过制备裸鼠胃癌转移模型获得转移前后胃癌肿瘤组织，应用双向电泳相关技术分离并筛选裸鼠胃癌转移前后肿瘤组织的差异表达蛋白，应用基因芯片技术筛选胃癌转移前后肿瘤组织的差异基因。为进一步研究胃癌转移机制及靶向治疗奠定理论基础。 方法： 1.体外培养低分化人胃腺癌细胞(BGC-823)，收集细胞并将其注射至裸鼠背部皮下，成瘤后经传代形成的实体瘤继续种于裸鼠胃壁，等待其转移。 2.获得转移前、后胃癌肿瘤组织（包括出现转移前、后胃壁肿瘤组织，肝转移肿瘤组织，肠系膜淋巴结转移组织），分别提取蛋白并采用双向电泳技术分离蛋白。用PDQest8.0图像分析软件对图像进行分析和差异点寻找。采用4800plus MALDITOF/TOF质谱仪对综合三组结果后的差异蛋白位点进行质谱鉴定。 3.制作裸鼠胃壁上转移前、后肿瘤组织的基因表达谱以研究胃癌转移前后的差异基因。将Cy3用单色标记法标记后与芯片杂交，得到不同基因的荧光信号，再将荧光信号转变为数字信号。经过统计分析得出差异基因。 结果： 1.成功制备裸鼠胃癌转移模型，胃壁种植9-10周后在部分裸鼠的肝脏及肠系膜淋巴结出现胃癌转移灶。 2.应用双向电泳技...

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【学位级别】：硕士

图1A1为背部皮下注射生理盐水；A2为注射BGC-823胃癌细胞后2-3周的生长情况图；B1为胃壁种植生理盐水；B2为胃癌肿瘤组织块3-4周后的生长情况图；C1为胃壁种植9-10周腹部解剖后肿瘤转移到肠；C2为肿瘤转移到肝脏

图2A为转移到肠系膜淋巴结上的银染双向电泳结果图；B为胃壁肿瘤转移后银染双向电泳结果图；C为胃壁肿瘤转移前的银染双向电泳结果图

图3D1为胃壁转移后与转移到肠上差异点比较；D2为胃壁转移前与转移到肠上比D1D2D3

图4A为转移前胃癌差异基因的杂交芯片荧光图，B转移后胃癌差异基因杂交芯片

本文编号：3888127