lncRNA DARS-AS1与PCBP1结合正反馈调控HIF通路促进乳腺癌转移的研究以及ALYREF在乳腺癌中的细胞功

发布时间：2022-11-12 08:45

　　为了研究乳腺癌的分子机制和为乳腺癌治疗寻找潜在分子靶标。我们首先分析了乳腺癌低氧表达谱筛选低氧相关lnc RNA,分析结果显示lnc RNA DARS-AS1与lnc RNA MIR210HG在低氧处理后显著上调。q RT-PCR实验验证发现lnc RNA DARS-AS1与lnc RNA MIR210HG在乳腺癌及其他多种肿瘤细胞中表达且低氧处理后确实显著上调。我们用RACE技术确定lnc RNA DARS-AS1与lnc RNA MIR210HG末端序列并用PCR扩增全长,发现lnc RNA DARS-AS1与lnc RNA MIR210HG全长分别为1095 nt和2303 nt。我们分析了TCGA数据库的乳腺癌RBP相关数据,ALYREF这个RBP引起了我们的注意。我们对Kaplan Meier plotter数据库和TCGA数据库中数据进行分析,发现lnc RNA DARS-AS1、lnc RNA MIR210HG与ALYREF与乳腺癌及其他肿瘤发生发展相关。我们利用RNAi技术沉默目的基因和用慢病毒过表达目的基因进行细胞功能学实验来观察肿瘤细胞迁移、侵袭和增殖的变化情况。利... 

【文章页数】：68 页

【学位级别】：硕士

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摘要
abstract
第一章 引言
    1.1 乳腺癌简介
    1.2 长链非编码RNA
    1.3 低氧微环境
    1.4 RNA结合蛋白
    1.5 本论文的研究内容
第二章 材料与方法
    2.1 实验材料与试剂
        2.1.1 仪器与设备
        2.1.2 实验材料
    2.2 实验方法
        2.2.1 TCGA数据库和Kaplan Meier plotter数据库
        2.2.2 细胞生物学实验
        2.2.3 分子生物学实验
第三章 lncRNA MIR210HG、lncRNA DARS-AS1和ALYREF的筛选,以及和临床关键性指标的关系
    3.1 低氧相关lncRNA的筛选与验证
    3.2 lncRNA DARS-AS1 与乳腺癌及多种肿瘤发生发展相关
    3.3 lncRNA MIR210HG与乳腺癌及多种肿瘤发生发展相关
    3.4 ALYREF与乳腺癌及多种肿瘤发生发展相关
    3.5 lncRNA DARS-AS1 全长扩增
    3.6 lncRNA MIR210HG全长扩增
    3.7 本章小结
第四章 lncRNA DARS-AS1与ALYREF在乳腺癌细胞系的功能研究
    4.1 lncRNA DARS-AS1 在乳腺癌细胞系中的功能研究
        4.1.1 低氧下沉默lncRNA DARS-AS1 抑制了乳腺癌细胞迁移和侵袭
        4.1.2 低氧下过表达lncRNA DARS-AS1 促进了乳腺癌细胞的迁移和侵袭
    4.2 ALYREF在乳腺癌细胞系中的功能研究
        4.2.1 沉默ALYREF抑制了乳腺癌细胞的增殖能力
        4.2.2 沉默ALYREF影响了乳腺癌细胞的凋亡和周期
    4.3 本章小结
第五章 lncRNA DARS-AS1 的分子机制研究
    5.1 HIF-1α促进了lncRNA DARS-AS1 表达
    5.2 lncRNA DARS-AS1 正反馈调控HIF通路
    5.3 lncRNA DARS-AS1 低氧后进入细胞核结合PCBP1 蛋白发挥功能
    5.4 本章小结
第六章 结论与展望
    6.1 结论与创新点
    6.2 展望
参考文献
附录
致谢
攻读硕士学位期间发表的论文



本文编号：3706059