成纤维细胞生长因子18（FGF18）腺病毒包装及其在小鼠骨关节炎治疗中的作用

发布时间：2024-03-23 09:09

　　目的:探究成纤维生长因子18(Fibroblast growth factor18,FGF18)对软骨细胞分化的影响,以及其对内侧半月板不稳定模型(Destabilization of the medial meniscus,DMM)小鼠骨关节炎的治疗效果,为利用FGF18治疗骨关节炎提供实验依据。方法:利用PCR的方法获取FGF18全长基因片段,再用AgeⅠ和NheⅠ酶切目的基因和pYr-1.1载体,连接后得到pYr-FGF18质粒。通过LR体外同源重组,将pYr-FGF18的表达框转移到pAd/PL-DEST腺病毒表达载体上,得到pAd/PL-FGF18质粒。用PacⅠ酶切pAd/PLFGF18,将线性化的质粒转染至HEK293A细胞中包装得到Ad-FGF18重组腺病毒载体,并进行扩增、纯化。Ad-GFP腺病毒也用同样的方法得到。用Ad-FGF18腺病毒感染HEK293A细胞并鉴定感染后的细胞中FGF18基因是否过表达。用Ad-FGF18腺病毒感染软骨细胞,观察其对软骨细胞分化的影响。对小鼠施行DMM手术,术后第2周开始关节腔内注射Ad-FGF18腺病毒,持续6周,术后第8周处死。...

【文章页数】：78 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
Abstract
主要缩略语及英文索引
第一章 前言
第二章 材料与方法
第三章 实验结果
第四章 讨论
第五章 结论
参考文献
综述
    参考文献
硕士期间的科研成果
致谢



本文编号：3935695