TGF-β1/Smad3在四氯化碳诱导小鼠急性肝损伤中的表达及其作用研究
发布时间：2024-02-21 03:28
肝脏是机体重要的代谢器官,肝损伤所致的肝脏功能失调,不仅危害患者健康,甚至可以危及患者生命安全。因此,积极探索肝损伤发病机制和寻找治疗策略,具有重要的临床意义。T GF-β1(transforming growth factorβ1)属于TGF-β家族成员,具有抑制肝细胞增殖及促进细胞外基质(extracellular matrix,ECM)生成等作用,被认为是诱导慢性肝损伤和肝纤维化的关键分子。果蝇Mad基因3哺乳动物类似基因(Mammalian homologs of the Drosophila Madgene3,Smad3)是介导TGF-β信号传导的重要分子,在慢性肝脏疾病及肝纤维化发生与发展过程中发挥重要作用。四氯化碳(c arbon tetrachloride,CCl4)诱导的肝损伤是典型的化学性肝损伤,相关文献以及实验室前期研究均表明T GF-β1/Smad3信号通路参与了CCl4诱导的慢性肝损伤的发生发展过程。但T GF-β1及其受体后信号分子Smad3在CCl4所致小鼠急性肝损伤时的表达及其作用机制仍不...
【文章页数】：85 页
【学位级别】：博士
【文章目录】：
中文摘要
ABSTRACT
第1章 文献综述
1.1 TGF-β1 的研究进展
1.1.1 TGF-β 超家族的组成及其生物学作用
1.1.2 TGF-β1 参与多种疾病的发生发展过程
1.2 TGF-β1 的信号传导
1.3 TGF-β/Smad信号与多种脏器疾病相关
1.4 TGF-β/Smad信号与肝脏疾病密切相关
1.5 肝脏损伤的研究进展
1.5.1 肝脏损伤的原因
1.5.2 TGF-β1/Smad3与CCl4所致肝脏损伤的关系
1.6 本研究主要内容与特色
1.6.1 研究设想
1.6.2 研究内容
1.6.3 特色和创新
第2章 材料与方法
2.1 实验动物
2.2 实验试剂
2.3 实验主要试剂的配制
2.3.1 4%多聚甲醛的配制
2.3.2 PBS缓冲液的配制
2.3.3 Western blotting相关试剂的配置
2.4 实验常用仪器
2.5 实验方法
2.5.1 动物模型的建立
2.5.2 血清转氨酶ALT及AST测定
2.5.3 H&E染色
2.5.4 免疫组织化学染色
2.5.5 TUNEL染色
2.5.6 RT-PCR
2.5.7 流式细胞术
2.5.8 ELISA
2.5.9 Western blotting
2.5.10 统计学处理
第3章 实验结果
3.1 TGF-β1 及Smad3在CCl4模型鼠肝损伤中的表达
3.1.1 CCl4肝损伤模型鼠的鉴定
3.1.2 CCl4模型鼠TGF-β1 水平变化
3.1.3 CCl4模型鼠肝组织中TβRII、Smads m RNA及Smad3蛋白表达变化
3.2 Smad3过表达对CCl4模型鼠肝损伤的影响
3.2.1 Smad3过表达小鼠肝组织Smad3表达水平
3.2.2 Smad3过表达对CCl4模型鼠血清ALT及AST水平的影响
3.2.3 Smad3过表达对CCl4模型鼠肝组织病理学变化的影响
3.2.4 Smad3过表达对CCl4模型鼠肝组织炎性细胞数量的影响
3.2.5 Smad3过表达对CCl4模型鼠炎性细胞因子水平的影响
3.2.6 Smad3过表达对CCl4模型鼠肝细胞凋亡的影响
3.3 Smad3 sh RNA对CCl4模型鼠肝损伤的影响
3.3.1 Smad3 sh RNA小鼠肝脏Smad3表达水平
3.3.2 Smad3 sh RNA对CCl4模型鼠血清ALT及AST水平的影响
3.3.3 Smad3 sh RNA对CCl4模型鼠肝组织病理学变化的影响
3.3.4 Smad3 sh RNA对CCl4模型鼠肝组织炎性细胞数量的影响
3.3.5 Smad3 sh RNA对CCl4模型鼠炎性细胞因子水平的影响
3.3.6 Smad3 sh RNA对CCl4模型鼠肝细胞凋亡的影响
第4章 讨论
4.1 CCl4诱导小鼠急性肝损伤过程中TGF-β1 的表达变化
4.2 Smad3在CCl4肝损伤模型鼠中的表达
4.3 Smad3过表达对CCl4模型鼠肝损伤的影响
4.4 Smad3基因敲低对CCl4模型鼠肝脏的保护作用
第5章 结论
参考文献
个人简介以及取得的成就
致谢
本文编号：3904970
【文章页数】：85 页
【学位级别】：博士
【文章目录】：
中文摘要
ABSTRACT
第1章 文献综述
1.1 TGF-β1 的研究进展
1.1.1 TGF-β 超家族的组成及其生物学作用
1.1.2 TGF-β1 参与多种疾病的发生发展过程
1.2 TGF-β1 的信号传导
1.3 TGF-β/Smad信号与多种脏器疾病相关
1.4 TGF-β/Smad信号与肝脏疾病密切相关
1.5 肝脏损伤的研究进展
1.5.1 肝脏损伤的原因
1.5.2 TGF-β1/Smad3与CCl4所致肝脏损伤的关系
1.6 本研究主要内容与特色
1.6.1 研究设想
1.6.2 研究内容
1.6.3 特色和创新
第2章 材料与方法
2.1 实验动物
2.2 实验试剂
2.3 实验主要试剂的配制
2.3.1 4%多聚甲醛的配制
2.3.2 PBS缓冲液的配制
2.3.3 Western blotting相关试剂的配置
2.4 实验常用仪器
2.5 实验方法
2.5.1 动物模型的建立
2.5.2 血清转氨酶ALT及AST测定
2.5.3 H&E染色
2.5.4 免疫组织化学染色
2.5.5 TUNEL染色
2.5.6 RT-PCR
2.5.7 流式细胞术
2.5.8 ELISA
2.5.9 Western blotting
2.5.10 统计学处理
第3章 实验结果
3.1 TGF-β1 及Smad3在CCl4模型鼠肝损伤中的表达
3.1.1 CCl4肝损伤模型鼠的鉴定
3.1.2 CCl4模型鼠TGF-β1 水平变化
3.1.3 CCl4模型鼠肝组织中TβRII、Smads m RNA及Smad3蛋白表达变化
3.2 Smad3过表达对CCl4模型鼠肝损伤的影响
3.2.1 Smad3过表达小鼠肝组织Smad3表达水平
3.2.2 Smad3过表达对CCl4模型鼠血清ALT及AST水平的影响
3.2.3 Smad3过表达对CCl4模型鼠肝组织病理学变化的影响
3.2.4 Smad3过表达对CCl4模型鼠肝组织炎性细胞数量的影响
3.2.5 Smad3过表达对CCl4模型鼠炎性细胞因子水平的影响
3.2.6 Smad3过表达对CCl4模型鼠肝细胞凋亡的影响
3.3 Smad3 sh RNA对CCl4模型鼠肝损伤的影响
3.3.1 Smad3 sh RNA小鼠肝脏Smad3表达水平
3.3.2 Smad3 sh RNA对CCl4模型鼠血清ALT及AST水平的影响
3.3.3 Smad3 sh RNA对CCl4模型鼠肝组织病理学变化的影响
3.3.4 Smad3 sh RNA对CCl4模型鼠肝组织炎性细胞数量的影响
3.3.5 Smad3 sh RNA对CCl4模型鼠炎性细胞因子水平的影响
3.3.6 Smad3 sh RNA对CCl4模型鼠肝细胞凋亡的影响
第4章 讨论
4.1 CCl4诱导小鼠急性肝损伤过程中TGF-β1 的表达变化
4.2 Smad3在CCl4肝损伤模型鼠中的表达
4.3 Smad3过表达对CCl4模型鼠肝损伤的影响
4.4 Smad3基因敲低对CCl4模型鼠肝脏的保护作用
第5章 结论
参考文献
个人简介以及取得的成就
致谢
本文编号：3904970
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