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RNA干扰MMP-2基因对人晶状体上皮细胞增殖及移行能力的影响

发布时间:2023-02-27 08:18
  目的研究RNA干扰基质金属蛋白酶-2(matrix metalloproteinase-2,MMP-2)表达对体外培养的人晶状体上皮细胞(human lens epithelial cells,hLECs)增殖、移行的影响。探讨RNA干扰技术抑制LECs增殖、移行的可行性,以探索防治后发性白内障的新方法。方法设计构建含有靶向MMP-2的短发夹RNA(short hairpin RNA,shRNA)质粒载体和不含靶向MMP-2的shRNA阴性对照质粒载体,体外转染hLECs SRA01/04,分别标记为MMP-2沉默组和阴性对照组;以等体积培养液代替转染质粒培养作为空白对照组。实时荧光定量PCR和Western blot检测转染后24 h MMP-2 mRNA及MMP-2蛋白的表达水平。MTT比色法测定细胞转染后24 h、48 h以及72 h时hLECs的增殖能力。细胞划痕实验方法测定转染后24 h、48 h时hLECs的移行愈合率。结果转染24 h后MMP-2沉默组mRNA及其蛋白的相对表达水平分别为0.202±0.075、80.856±2.165,与空白对照组1.041±0.163和...

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1 材料与方法
2 结果
3 讨论



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