模拟微重力效应对人骨肉瘤细胞中心体及BUB1的影响

发布时间：2017-07-04 21:16

  本文关键词：模拟微重力效应对人骨肉瘤细胞中心体及BUB1的影响

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【摘要】： 空间环境对人体的主要影响因素是电离辐射和持续的微重力。已有研究表明空间微重力环境可导致宇航员的机体出现多种生理性和病理性改变。为了从细胞水平考察微重力效应对机体的损伤,本研究以人骨肉瘤细胞为实验材料,通过回转器模拟微重力效应,研究模拟微重力效应条件下人骨肉瘤细胞微管细胞骨架、中心体及纺锤体检验点蛋白BUB1的变化情况。研究结果表明:经过模拟微重力处理72小时后人骨肉瘤细胞U-2 OS细胞贴壁铺展程度降低,微管骨架有序性下降,排列紊乱。模拟微重力效应能够导致人骨肉瘤细胞U-2 OS纺锤体多极率增加,且随着模拟微重力时间的加长呈加大的趋势。虽然人骨肉瘤细胞系U-2 OS、MG-63和Saos-2中心体组份Centrin-2的免疫荧光结果表明人骨肉瘤细胞中在双极和多极纺锤体极区皆可检测到中心体的存在,但是Western Blot实验结果显示模拟微重力效应后中心体蛋白γ-tubulin表达量无明显上调,提示模拟微重力效应处理后出现的额外的中心体并不是由于发生中心体额外复制才出现的。实时定量PCR和Western Blot结果表明模拟微重力效应会导致U-2 OS和MG-63细胞纺锤体组装检验点蛋白BUB1 mRNA水平及蛋白水平表达量上调。关于上述模拟微重力效应影响中心体及检验点蛋白BUB1的结果在空间生物学的研究中还未见报道,因此对于空间生物学在相关方面的研究可能具有参考价值。
【关键词】：模拟微重力效应 人骨肉瘤细胞 中心体 BUB1
【学位授予单位】：哈尔滨工业大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2010
【分类号】：R85
【目录】：

• 摘要4-5
• Abstract5-8
• 第1章 绪论8-19
• 1.1 空间生物学与航天医学研究进展8-10
• 1.2 微重力对细胞的生物学效应10-13
• 1.2.1 微重力对细胞骨架的影响10-11
• 1.2.2 微重力对细胞周期的影响11-12
• 1.2.3 微重力对细胞信号转导途径的影响12-13
• 1.3 中心体概述13-15
• 1.4 纺锤体组装检验点及纺锤体组装检验点蛋白BU81 概述15-18
• 1.4.1 纺锤体组装检验点概述15-17
• 1.4.2 纺锤体检验点蛋白BU81 概述17-18
• 1.5 课题研究的目的和意义18
• 1.6 课题的研究内容18-19
• 第2章 实验材料和方法19-26
• 2.1 实验材料19-22
• 2.1.1 细胞系19
• 2.1.2 细胞培养用品19-20
• 2.1.3 常用试剂20-21
• 2.1.4 主要仪器设备21-22
• 2.1.5 主要软件22
• 2.2 实验方法22-25
• 2.2.1 模拟微重力效应22-23
• 2.2.2 细胞计数23
• 2.2.3 流式细胞术对细胞周期的检测23-24
• 2.2.4 免疫荧光对细胞骨架、纺锤体及中心体变化的检测24
• 2.2.5 实时定量PCR技术对于基因RNA水平表达量变化的检测24-25
• 2.2.6 Western Blot对蛋白表达量变化的检测25
• 2.3 本章小结25-26
• 第3章 模拟微重力效应下U-2 OS细胞微管及纺锤体的变化26-30
• 3.1 模拟微重力效应对人骨肉瘤细胞微管细胞骨架的影响26-27
• 3.2 模拟微重力效应对人骨肉瘤细胞纺锤体的影响27-29
• 3.2.1 模拟微重力效应下人骨肉瘤细胞的纺锤体形态变化27
• 3.2.2 模拟微重力效应下人骨肉瘤细胞的纺锤体多极率27-29
• 3.3 讨论29
• 3.4 本章小结29-30
• 第4章 模拟微重力效应对人骨肉瘤细胞中心体的影响30-34
• 4.1 人骨肉瘤细胞的中心体形态30
• 4.2 模拟微重力效应对中心体蛋白γ-tubulin表达量的影响30-33
• 4.3 讨论33
• 4.4 本章小结33-34
• 第5章 模拟微重力效应对人骨肉瘤细胞中BU81 的影响34-38
• 5.1 模拟微重力效应对人骨肉瘤细胞纺锤体检验点蛋白 BUB1 mRNA 水平的影响34-35
• 5.2 模拟微重力效应对人骨肉瘤细胞纺锤体检验点蛋白 BUB1 蛋 白水平的影响35-37
• 5.3 讨论37
• 5.4 本章小结37-38
• 结论38
• 展望38-39
• 参考文献39-44
• 攻读学位期间发表的学术论文44-46
• 致谢46

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本文编号：519377