乳腺癌并发抑郁症动物模型的建立与中药干预

发布时间：2020-03-20 02:18

【摘要】：目的:1.建立乳腺癌并发抑郁症(Breast Cancer Complicated with Depression,BC RD)动物模型,并从行为学、血液学和组织病理学等相关指标确定模型评价体系,为BCRD的研究奠定模型基础。2.以建立的BCRD小鼠模型为研究对象,给予中药复方逍遥抗癌解郁方干预,研究其抗肿瘤、抗抑郁的疗效,并初步推测出其治疗BCRD的作用机理,为BCRD的防治研究提供方向。方法:1.BCRD模型的建立。BALB/c雌性小鼠腋下注射4T1炎性乳腺癌细胞(107个/ml,0.1 ml),7天后观察是否成模,成模的小鼠按糖水消耗随机分为2组:乳腺癌组和BCRD组,未注射乳腺癌细胞的小鼠根据糖水消耗随机分为2组:空白组与抑郁症组。BCRD组与抑郁症组连续21天给予背部皮下注射皮质酮(30mg/Kg)造就抑郁症模型,同时每周一次糖水消耗测试。BCRD模型制备21天后,测定各组旷场实验、悬尾实验与新奇摄食实验;Elisa检测血浆促肾上腺激素释放激素(CRH)、促肾上腺皮质激素(ACTH)、皮质酮(CORT)、5-羟色胺(5-HT),血清多巴胺(DA)、去甲肾上腺素(NE),肿瘤标志物癌抗原15-3(CA15-3)、癌胚抗原(CEA)和糖类抗原CA125的含量;检测乳腺肿瘤瘤重与瘤体积;HE染色观察各组小鼠海马、肾上腺和肿瘤的病理改变;q RT-PCR检测海马中NR2A、NR2B、CREB和Ca MKⅡ基因以及肿瘤中NR2A和NR2B基因的表达。2.逍遥抗癌解郁方(Xiaoyao Kangai Jieyu Compound,XYKAJY)的干预作用。建立BCRD小鼠模型,并根据糖水消耗量随机分为6组:空白组、BCRD组、化疗组、中药组、化疗(20 mg/Kg)联合抗抑郁药(2.6 mg/Kg)组、化疗联合中药组;造抑郁模型的同时给药,给药完成后检测上述指标。结果:1.与空白组比较,BCRD组小鼠糖水消耗明显降低(P0.01);新奇摄食实验中首次摄食耗时明显增加(P0.05);悬尾实验中不动时间明显上升(P0.01或P0.05);旷场实验中水平运动与垂直运动明显减少(P0.01或P0.05);肿瘤标物CA15-3、CA125和CEA的表达显著升高(P0.01);单胺类神经递质NE、DA和5-HT均明显下降(P0.01);HPA轴相关指标CORT、ACTH和CRH明显升高(P0.01或P0.05);HE染色发现海马、肾上腺和肿瘤出现明显病理改变;NR2A、NR2B和Ca MKⅡ基因的表达明显升高,CREB基因的表达明显降低(P0.01)。2.与空白比较,BCRD模型小鼠各项指标均出现明显异常。与模型组比较,中药复方逍遥抗癌解郁方组小鼠糖水消耗明显升高,探索欲望明显加强,行为绝望状态显著改善(P0.01或P0.05);单胺类神经递质DA和NE的表达显著升高(P0.01或P0.05);HPA轴相关指标CORT、ACTH和CRH显著降低(P0.01);海马损伤和肾上腺功能亢进得到缓解;NR2A、NR2B、Ca MKⅡ和CREB基因的表达趋于正常(P0.01);化疗联合中药组乳腺肿瘤细胞出现大面积坏死,肿瘤瘤重和瘤体积明显降低(P0.01或P0.05),肿瘤标物CA15-3、CA125和CEA的表达显著降低(P0.01或P0.05)。结论:1.采用腋下注射乳腺癌细胞联合背部皮下注射皮质酮的复合造模方法,初步成功复制了BCRD动物模型。2.结合BCRD的临床特征,采用糖水消耗、旷场实验、新奇摄食实验、悬尾实验,肿瘤标志物CA153、CA125和CEA,单胺类神经递质5-HT、DA和NE的含量和海马和乳腺肿瘤病理结构等一系列指标检测,可建立一套乳腺癌癌并发抑郁症动物模型评价体系。3.逍遥抗癌解郁方可明显改善BCRD小鼠的抑郁行为,上调单胺类神经递质高分泌,辅助化疗药物减低肿瘤标志物表达和抗肿瘤生长,其作用可能与保护海马损伤和逆转HPA轴功能亢进,改变NR2A、NR2B、Ca MKⅡ和CREB基因表达有关。
【图文】：

肿瘤离体后肉眼下观察可见，乳腺肿瘤呈不规则的长椭圆形、球形或结节形，外表有完整的包膜包被，颜色为肉红色，有丰富的血管包裹，部分肿瘤分化生长成多个瘤体，或者有黑色的坏死区，质硬。结果见图1。注：A.乳腺癌组 B.BCRD 组图 1 各组小鼠乳腺肿瘤肉眼形态特征3.1.3 光镜下小鼠乳腺肿瘤病理检测结果光镜下观察小鼠乳腺肿瘤结构，乳腺癌组和 BCRD 模型组肿瘤细胞排列紧密，坏死少，核质比大，细胞形态不规则，间质与实质界限不清，间质可见新生血管，偶可见肿瘤细胞侵入血管造成的血栓，400 倍可见明显的核分裂现象；与乳腺癌组比较，BCRD 组肿瘤细胞生长更加密集。结果见图 2。注：A.乳腺癌组 B.BCRD 组图 2 各组小鼠乳腺肿瘤病理染色结果（A1，B1：×40；A2，B2：×400）3.2 肿瘤标志物检测结果与空白组比较

注：A.乳腺癌组 B.BCRD 组图 2 各组小鼠乳腺肿瘤病理染色结果（A1，B1：×40；A2，B2：×400）3.2 肿瘤标志物检测结果与空白组比较，抑郁组 CA153，，乳腺癌组 CA153 和 CA125，以及 BCRD
【学位授予单位】：湖南中医药大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R285.5;R-332

【参考文献】

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本文编号：2591090