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云芝胞内糖肽不同组分抗酒精性肝损伤的活性评价

发布时间:2024-02-19 10:00
  酒精性肝病(Alcoholic liver disease,ALD)是过量饮酒引起的中毒性肝损伤。长期过量饮酒是世界各地常见的保健问题,具有显著的发病率和死亡率。酒精性肝病作为全球性的重大疾病,已经严重威胁着人们的生命健康。云芝胞内糖肽(PSK)是从云芝发酵菌丝体中提取的细胞内蛋白结合多糖。本实验室对其抗酒精性肝损伤的作用已经进行了初步的研究,进行了分离纯化,并表征了纯化组分的结构,但纯化后组分的抗酒精性肝损伤活性尚未评价。因此,本论文通过建立酒精性肝损伤小鼠模型评价云芝胞内糖肽纯化组分的抗酒精性肝损伤活性,并通过肠道微生物分析探索PSK-1在酒精性肝损伤小鼠肠道菌群中的作用。主要研究工作如下:(1)采用不同浓度的NaCl溶液,利用AKTA蛋白纯化系统、DEAE FF柱对PSK-1进行分离,得到PSK-1b和PSK-1c,再通过Superdex 75凝胶柱进一步分离得到PSK-1b1和PSK-1c1。(2)建立NIAAA小鼠模型评价PSK-1b1和PSK-1c1对酒精性肝损伤的防治作用。结果显示:PSK-1b1和PSK-1c1均可以显著的降低血清中ALT和AST的活力;PSK-1b1和...

【文章页数】:60 页

【学位级别】:硕士

【文章目录】:
摘要
Abstract
第一章 绪论
    1.1 酒精性肝损伤
        1.1.1 酒精性肝损伤的流行病学
        1.1.2 酒精性肝损伤发病机制
        1.1.3 酒精性肝病的治疗
        1.1.4 酒精性肝损伤动物模型
    1.2 药食用真菌
        1.2.1 云芝研究概况
        1.2.2 云芝多糖
        1.2.3 云芝胞内糖肽简介
        1.2.4 云芝胞内糖肽的药理活性
        1.2.5 云芝胞内糖肽的制备
    1.3 立题依据及研究内容
        1.3.1 立题依据
        1.3.2 研究内容
第二章 材料与方法
    2.1 实验材料与仪器
        2.1.1 实验材料与试剂
        2.1.2 实验仪器与设备
    2.2 实验方法
        2.2.1 PSK-1b1、PSK-1c1的制备
        2.2.2 分离组分的常规检测
        2.2.3 酒精性肝损伤小鼠模型建立
        2.2.4 小鼠进食量和体重的检测
        2.2.5 小鼠血清指标的检测
        2.2.6 小鼠肝组织抗氧化指标的检测
        2.2.7 肝组织病理切片及H&E染色
        2.2.8 qRT-PCR法检测
        2.2.9 免疫印迹法(Westernblot)检测
    2.3 统计学分析
第三章 结果与讨论
    3.1 PSK-1b1、PSK-1c1的制备
    3.2 PSK-1b1、PSK-1c1在NIAAA小鼠模型上的活性评价
        3.2.1 NIAAA小鼠进食量及体重变化率
        3.2.2 NIAAA小鼠的肝体比
        3.2.3 NIAAA小鼠模型血清生化指标
        3.2.4 NIAAA小鼠肝组织的病理学组织切片观察
        3.2.5 PSK-1b1、PSK-1c1对NIAAA小鼠肝组织AMPK通路相关基因的调节
        3.2.6 云芝胞内糖肽各组分对NIAAA小鼠肝组织中TLR4通路相关基因的调节..
        3.2.7 云芝胞内糖肽各组分对NIAAA小鼠肝组织中CYP2E1转录水平的影响
        3.2.8 云芝胞内糖肽各组分对NIAAA小鼠肝组中氧化酶系转录水平的影响
        3.2.9 云芝胞内糖肽各组分对NIAAA小鼠肝组织中细胞因子转录水平的影响
        3.2.10 云芝胞内糖肽各组分对NIAAA小鼠肝组织中蛋白表达的影响
    3.3 云芝胞内糖肽分离组分在急性酒精性肝损伤小鼠模型上的活性评价
        3.3.1 急性ALD小鼠体重变化率
        3.3.2 急性ALD小鼠的肝体比
        3.3.3 急性ALD小鼠模型血清生化指标
        3.3.4 急性ALD小鼠模型肝组织抗氧化指标
        3.3.5 急性ALD小鼠模型肝组织的病理学组织切片观察
        3.3.6 云芝胞内糖肽各组分对急性ALD小鼠肝组织AMPK通路相关基因的影响.
        3.3.7 云芝胞内糖肽各组分对急性ALD小鼠肝组织TLR4通路相关基因的影响
        3.3.8 云芝胞内糖肽各组分对急性ALD小鼠肝组织CYP2E1转录水平的影响
        3.3.9 云芝胞内糖肽各组分对急性ALD小鼠肝组织中氧化酶系转录水平的影响
        3.3.10 云芝胞内糖肽各组分对急性ALD小鼠肝组织中细胞因子转录水平的影响.
        3.3.11 云芝胞内糖肽各组分对急性ALD小鼠肝组织中蛋白表达的影响
    3.4 PSK-1对急性酒精性肝损伤小鼠肠道微生物的影响
        3.4.1 小鼠粪便DNA纯度检测结果
        3.4.2 测序数据统计结果
        3.4.3 酒精对小鼠盲肠微生物的影响
        3.4.4 PSK-1对急性酒精肝损伤小鼠盲肠微生物的影响
        3.4.5 PSK-1对小鼠粪便微生物的影响
主要结论与展望
    主要结论
    展望
致谢
参考文献
附录:作者在攻读硕士学位期间发表的论文



本文编号:3902513

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