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新型蝎毒多肽类钠通道调制剂的分离纯化与细胞电生理功能初探

发布时间:2024-02-24 23:32
  东亚钳蝎在我国分布广泛,其中陕北黄土高原由于地理环境独特,造就了丰富的蝎资源。蝎子作为传统中药材,有着悠久的应用历史,但对其药效组分及药效机理仍知之甚少。现代研究表明,蝎子的药用价值主要在于含有大量神经毒素的蝎毒多肽,蝎毒多肽能够特异性作用于钠通道,影响通道的门控特性,而钠通道在生理和病理过程中发挥重要作用,所以,蝎毒多肽作为钠通道门控调节剂具有研究价值。基于此,本论文利用色谱分离纯化技术从蝎粗毒中获得系列单一活性多肽组分,再利用全细胞膜片钳技术记录检测不同活性多肽组分对钠通道的调控作用。主要研究内容及结果如下:(1)蝎毒多肽的分离纯化及分子量测定蝎粗毒通过SephadexTM G-50 Fine凝胶色谱柱等度洗脱,获得三个色谱峰,分别命名为H-1、H-2和H-3。H-2经反相高效液相Atlantis T3柱梯度洗脱,获得28个色谱峰。其中H-2-10H-2-15六个组分各自再经反相高效液相分析纯化后共获得14个单体组分。其中5个得率和纯度较高的单体组分,冷冻干燥后用电喷雾离子化质谱(ESI-MS)技术测定分别得到了分子量为3766 Da和3...

【文章页数】:87 页

【学位级别】:硕士

【部分图文】:

图1-1电压门控钠通道亚基的主要结构

图1-1电压门控钠通道亚基的主要结构

图1-1电压门控钠通道亚基的主要结构Fig.1-1Theprimarystructuresofthesubunitsofthevoltage-gatedsodiumchannels表1-1哺乳动物钠通道α亚基Tab.1-1Mammalian....


图1-2钠通道受体位点示意图

图1-2钠通道受体位点示意图

图1-2钠通道受体位点示意图[59]Fig.1-2Sodiumchannelreceptorsite钠通道神经毒素结合位点1是由四个结构域中链接S5~S6的P区构成,是河豚毒素(TTX)和蛤蚌毒素(STX)还有μ-芋螺毒素的结合位点。虽然TTX和....


图2-1蝎粗毒SephadexG-50分子筛的分离Fig.2-1SeparationofCrudePoisonSephadexG-50MolecularSieve注:等度洗脱,流动相为0.05mol/L乙酸铵,流速为2mL/min,280nm紫外检测

图2-1蝎粗毒SephadexG-50分子筛的分离Fig.2-1SeparationofCrudePoisonSephadexG-50MolecularSieve注:等度洗脱,流动相为0.05mol/L乙酸铵,流速为2mL/min,280nm紫外检测

图2-1蝎粗毒SephadexG-50分子筛的分离Fig.2-1SeparationofCrudePoisonSephadexG-50MolecularSieve注:等度洗脱,流动相为0.05mol/L乙酸铵,流速为2mL/min,280n....


图2-2条件优化前H-2的HPLC图谱

图2-2条件优化前H-2的HPLC图谱

图2-2条件优化前H-2的HPLC图谱Fig.2-3HPLCchromatogramofH-2beforeconditionoptimization



本文编号:3909732

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