青藤碱对DC2.4 JAK/STAT信号通路磷酸化的影响
发布时间：2024-04-16 03:51
目的1.对LPS刺激后的DC2.4成熟性进行鉴定,确保后续实验的科学性与可行性。2.青藤碱作用于成熟DC2.4后,观察细胞内SOCS1、JAK2、STAT1蛋白与基因含量变化及上清液中IFN-γ、IL-6、IL-10含量变化,探讨青藤碱对DC2.4细胞内JAK/STAT信号通路的磷酸化作用机制,及其治疗类风湿关节炎机制,为治疗类风湿关节炎寻找新的治疗靶点。方法1.通过形态学及细胞膜上表型CD11C、CD80及CD86判定DC2.4成熟状态。2.将DC2.4细胞进行培养并分为A、B、C三组,A组为空白组,B组为模型组,C组为青藤碱组。A组不做处理,B组、C组分别经5μg/m L的LPS刺激培养24h,使DC2.4成熟,C组中继续加入40μg/mL的青藤碱,A组、B组不做进一步处理,继续培养三组细胞48h。Rt-PCR法检测三组细胞中SOCS1、JAK2、STAT1基因表达;Western Blot法检测各组细胞中SOCS1、JAK2、STAT1、p-JAK2、p-STAT1蛋白表达;取上清液,ELISA法检测炎症因子IFN-γ、IL-6、IL-10含量。结果1.DC2.4成熟性鉴定(1)...
【文章页数】：100 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
中文摘要
Abstract
英文缩写
序论
实验技术路线图
第一章 DC2.4诱导成熟与鉴定
1.前言
2.实验材料
2.1 实验细胞株
2.2 实验仪器及材料
2.3 细胞培养所需试剂和配置方法
3.实验方法
3.1 DC2.4培养与分组
3.2 DC2.4的活力鉴定
3.3 DC2.4表面标志物检测
3.4 统计学分析
4.结果
4.1 细胞形态学分析
4.2 细胞表面标志物检测
5.讨论
6.小结
第二章 青藤碱对DC2.4JAK/STAT信号通路磷酸化的影响
1.前言
1.1 青藤碱研究概况
1.2 DC与JAK/STAT信号通路
2.实验材料
2.1 实验细胞
2.2 主要试剂
2.3 实验仪器及材料
3.实验方法
3.1 Rt-PCR检测JAK/STAT通路中相关基因JAK2、STAT1及SOCS1的表达
3.2 WesternBlot检测青藤碱对成熟DC2.4JAK2、p-JAK2、STAT1、p-STAT1及SOCS1蛋白表达
4.实验结果
4.1 Rt-PCR检测JAK/STAT通路中相关基因JAK2、STAT1及SOCS1的表达变化
4.2 WesternBlot检测中青藤碱对成熟DC2.4JAK2、p-JAK2、STAT1、p-STAT1及SOCS1蛋白表达的影响
5.讨论
5.1 DC与JAK2/STAT1通路
5.2 DC与SOCS
5.3 选择药物浓度及作用时间的依据
6.小结
6.1 青藤碱对JAK/STAT通路中相关基因JAK2、STAT1及SOCS表达的影响
6.2 青藤碱对成熟的DC2.4JAK2、p-JAK2、STAT1、p-STAT及SOCS1蛋白表达的影响
第三章 青藤碱治疗类风湿关节炎的机制
1.前言
1.1 类风湿关节炎中医认识
1.2 类风湿关节炎现代医学研究进展
2.实验材料
2.1 实验细胞
2.2 主要试剂及试剂盒
2.3 实验仪器及材料
3.实验方法
3.1 分组
3.2 青藤碱对DC2.4细胞分泌炎性因子IL-6、IL-10、IFN-γ含量的影响
3.3 统计学分析
4.实验结果
4.1 ELISA检测DC2.4G细胞上清中IL-6的含量
4.2 ELISA检测DC2.4细胞上清中IL-10的含量
4.3 ELISA检测DC2.4细胞上清中IFN-γ的含量
5.讨论
5.1 类风湿关节炎中医中药治疗
5.2 青藤碱治疗类风关的研究进展
5.3 类风湿关节炎与炎症
5.4 类风湿关节炎与DC
5.5 类风湿关节炎与JAK/STAT通路
5.6 SOCS1与RA
5.7 青藤碱治疗类风湿关节炎的可能机制
6.小结
总论
本研究创新性
存在问题及展望
参考文献
致谢
综述
参考文献
在读期间公开发表的学术论文、专著及科研成果
本文编号：3956405
【文章页数】：100 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
中文摘要
Abstract
英文缩写
序论
实验技术路线图
第一章 DC2.4诱导成熟与鉴定
1.前言
2.实验材料
2.1 实验细胞株
2.2 实验仪器及材料
2.3 细胞培养所需试剂和配置方法
3.实验方法
3.1 DC2.4培养与分组
3.2 DC2.4的活力鉴定
3.3 DC2.4表面标志物检测
3.4 统计学分析
4.结果
4.1 细胞形态学分析
4.2 细胞表面标志物检测
5.讨论
6.小结
第二章 青藤碱对DC2.4JAK/STAT信号通路磷酸化的影响
1.前言
1.1 青藤碱研究概况
1.2 DC与JAK/STAT信号通路
2.实验材料
2.1 实验细胞
2.2 主要试剂
2.3 实验仪器及材料
3.实验方法
3.1 Rt-PCR检测JAK/STAT通路中相关基因JAK2、STAT1及SOCS1的表达
3.2 WesternBlot检测青藤碱对成熟DC2.4JAK2、p-JAK2、STAT1、p-STAT1及SOCS1蛋白表达
4.实验结果
4.1 Rt-PCR检测JAK/STAT通路中相关基因JAK2、STAT1及SOCS1的表达变化
4.2 WesternBlot检测中青藤碱对成熟DC2.4JAK2、p-JAK2、STAT1、p-STAT1及SOCS1蛋白表达的影响
5.讨论
5.1 DC与JAK2/STAT1通路
5.2 DC与SOCS
5.3 选择药物浓度及作用时间的依据
6.小结
6.1 青藤碱对JAK/STAT通路中相关基因JAK2、STAT1及SOCS表达的影响
6.2 青藤碱对成熟的DC2.4JAK2、p-JAK2、STAT1、p-STAT及SOCS1蛋白表达的影响
第三章 青藤碱治疗类风湿关节炎的机制
1.前言
1.1 类风湿关节炎中医认识
1.2 类风湿关节炎现代医学研究进展
2.实验材料
2.1 实验细胞
2.2 主要试剂及试剂盒
2.3 实验仪器及材料
3.实验方法
3.1 分组
3.2 青藤碱对DC2.4细胞分泌炎性因子IL-6、IL-10、IFN-γ含量的影响
3.3 统计学分析
4.实验结果
4.1 ELISA检测DC2.4G细胞上清中IL-6的含量
4.2 ELISA检测DC2.4细胞上清中IL-10的含量
4.3 ELISA检测DC2.4细胞上清中IFN-γ的含量
5.讨论
5.1 类风湿关节炎中医中药治疗
5.2 青藤碱治疗类风关的研究进展
5.3 类风湿关节炎与炎症
5.4 类风湿关节炎与DC
5.5 类风湿关节炎与JAK/STAT通路
5.6 SOCS1与RA
5.7 青藤碱治疗类风湿关节炎的可能机制
6.小结
总论
本研究创新性
存在问题及展望
参考文献
致谢
综述
参考文献
在读期间公开发表的学术论文、专著及科研成果
本文编号：3956405
本文链接：https://www.wllwen.com/yixuelunwen/zhongyaolw/3956405.html