热消融及超声介导长春瑞滨长循环热敏脂质体靶向释放增强治疗兔VX2肿瘤的实

发布时间：2016-10-11 22:46

  本文关键词：热消融及超声介导长春瑞滨长循环热敏脂质体靶向释放增强治疗兔VX2肿瘤的实验研究，由笔耕文化传播整理发布。

《第四军医大学》 2013年

热消融及超声介导长春瑞滨长循环热敏脂质体靶向释放增强治疗兔VX2肿瘤的实验研究

李卓  

【摘要】：第一部分兔VX2后肢肌内肿瘤模型的建立及其生物学评价 目的：兔VX2肿瘤细胞株已广泛应用在兔的肝、肾、骨及脑等部位制成肿瘤模型，但是接种于肌肉内建立的肿瘤模型经常作为传种之瘤株很少用于实验研究。建立兔VX2肌肉肿瘤模型并观察其生物学特性。方法：①实验材料：2-3个月龄纯种健康新西兰兔30只，体重1.5～2.0kg,②实验过程：采用组织块包埋法，将VX2肿瘤组织移植于30只新西兰大白兔大腿股外侧肌肉内建立肌肉内肿瘤模型。③评估：一组随机取15只荷瘤兔，分别在接种肿瘤后7、10、14、21、26d行超声检查；计算肿瘤体积(V)=0.5×ab2其中a、b表示肿瘤的长径和短径以平均TV值绘制肿瘤生长曲线。计算肿瘤生长率（TGR），根据公式TGR=(a2b2-a1b1)/a1b1×100%计算。另一组15只荷瘤兔分别于10、15、20、25、30d随机处死3只荷瘤兔，剥除肿瘤，测量肿瘤体积，并与超声测量结果比较。病理检查肿瘤的组织学特性。 结果：30只兔肌肉肿瘤模型均制作成功进入结果分析。①建立的兔VX2肌肉肿瘤模型成瘤率高达100%，接种7～10d，肿瘤生长迅速，生长率为56.7%，14～21d肿瘤再次迅速增长生长率为97.2%。②移植肿瘤组织后7天，二维超声示部分荷瘤兔后肢肌肉内可见等回声或偏低回声结节；至14天左右，所有荷瘤兔肌肉均内探及等回声或偏低回声结节，轮廓规整边界清，其内回声分布均匀，并可见稀疏彩色血流信号，肿物周边可见较丰富的彩色血流环绕，20天左右，一部分肿瘤内，回声分布不均，可探及小片状液性暗区及斑片样强回声钙化灶；并且随着肿时间的延长，坏死区域逐渐增多。③病理组织学观测：镜下可见肿瘤细胞生长旺盛，与片状坏死区分界清晰，坏死区域内肿瘤细胞体积明显增大，细胞密度降低，排列不齐，，状态不规整，细胞核深染，分裂象较多，坏死区域内肿瘤细胞核固缩、碎裂。④剥除肿瘤，测量肿瘤体积，并与超声测量结果比较，差异无统计学意义。 结论：此模型移植成功率高，建模时间短且肿瘤生长迅速，肿瘤血供丰富。是一种较为理想的用于研究肿瘤局部治疗的实验模型。 第二部分低功率射频靶向释放长春瑞滨长循环热敏脂质体在兔VX2肿瘤的治疗研究 目的：利用射频技术精确的定位和热效应靶向释放携载化疗药物的热敏脂质体在兔VX2肿瘤治疗中的疗效。 方法：应用组织块包埋法建立新西兰大白兔股部肌肉内VX2肿瘤模型。待肿瘤生长至0.8～1.0cm时，根据肿瘤大小按区组随机的方法将36只荷瘤兔分成4组。对照组（CON）：静脉注射等量生理盐水。低功率射频组（RF）：输出功率1W，30min，靶温度42～43℃。长春瑞滨长循环热敏脂质体组（V-LCTL）：给予1.8mg/kg长春瑞滨长循环热敏脂质体。长春瑞滨长循环热敏脂质体联合低功率射频组（RF+V-LCTL）：功率1W,时间30min，低功率射频前给予1.8mg/kg长春瑞滨长循环热敏脂质体。治疗间隔时间为2天，即：在荷瘤兔分组后的第1、4、7天。治疗前及治疗后超声连续观测肿瘤的大小，治疗后采用高效液相色谱（HPLC）法测定长春瑞滨静脉注射后在体内各组织内的分布。治疗结束后8d，处死实验兔，处死动物前抽取VX2兔静脉血，行血常规检查，获得不同实验组白细胞及血小板的计数。标本分别做HE染色和Western blotting方法检测蛋白表达。 结果：所有实验兔均能耐受治疗完成实验。RF+V-LCTL组抑瘤率为70.3％，显著高于RF和V-LCTL组，差异有统计学意义（P0.05）；低功率射频组无明显消融效果。病理检查显示低功率射频作用无明显肿瘤坏死，而RF+V-LCTL组可见明显的肿瘤细胞损伤及坏死。并且实验结果表明RF+V-LCTL组在给药24h后相比V-LCTL组在肿瘤组织长春瑞滨浓度最高，而心脏、肺脏组织中的长春瑞滨浓度最低。肿瘤细胞凋亡的检测。V-LCTL组和RF+V-LCTL组均可明显升高Caspase-3活性片段，Bax的表达水平，降低Bcl-2的表达水平。 结论：与低功率射频治疗组及长春瑞滨热长循环热敏脂质体治疗组相比，低功率射频靶向释放长春瑞滨热长循环热敏脂质体对兔VX2肿瘤具有明显的抑瘤效果，较好的药物靶向性、和最低的心肺毒副作用。该联合治疗可扩大射频消融的治疗区域，对减少射频消融后肿瘤复发有重要意义。 第三部分高强度聚焦超声靶向释放长春瑞滨长循环热敏脂质体抗肿瘤的实验研究 目的：应用HIFU作为靶向释放热源，探讨HIFU靶向释放长春瑞滨长循环热敏脂质体联合抗肿瘤的疗效。 方法：应用组织块包埋法建立新西兰大白兔股部肌肉内VX2肿瘤模型。待肿瘤直径至0.8～1.0cm时，按区组随机的方法将24只荷瘤兔分成4组。对照组（CON）、单纯HIFU组、长春瑞滨热敏脂质体组（V-LCTL）、HIFU联合长春瑞滨热敏脂质体组(HIFU+V-LCTL)。治疗间隔时间为2天，即：在荷瘤兔分组后的第1、3、5天。治疗后，观察肿瘤体积和重量变化，计算抑瘤率。治疗结束后8d，处死动物，处死动物前抽取VX2兔静脉血，行血常规检查，获得不同实验组白细胞及血小板的计数。并对肿瘤进行Western blotting方法检测蛋白表达，同时送病理进行HE染色，观察肿瘤组织病理形态学变化。 结果：各组荷瘤兔的肿瘤生长曲线：对照组肿瘤生长最快，HIFU组与对照组肿瘤体积增长趋势相当，V-LCTL组和HIFU+V-LCTL组肿瘤生长均受到明显抑制，且肿瘤体积较其他两组明显缩小。并且HIFU+V-LCTL组与V-LCTL组相比，HIFU+V-LCTL组肿瘤体积缩小显著。HIFU+V-LCTL组的抑瘤率为71.0％，显著高于HIFU组和V-LCTL组（0.8%和47.1%，P0.05）。V-LCTL组和HIFU+V-LCTL组Caspase-3活性片段和Bax的表达水平明显升高，同时Bcl-2的表达水平显著降低。病理结果显示对照组和单纯HIFU组肿瘤细胞紧密排列呈实体巢状，细胞大，胞浆丰富，瘤体内微血管完整；HIFU+V-LCTL组细胞明显固缩变小，细胞核出现固缩、碎裂和溶解。毛细血管壁结构模糊，嗜伊红染色增加，血管腔内有大量红细胞集聚。 结论： HIFU技术和携载化疗药物的热敏脂质体联合应用，通过HIFU靶向释放载药热敏脂质体在肿瘤局部的高度浓集，实现化疗药物增强HIFU对肿瘤消融的作用。扩大了HIFU的热消融范围及适应征。并减轻抗肿瘤化疗药物的全身毒副反应。上述结果为寻求一种有效、安全、靶向性高的肿瘤治疗手段提供了新的思路。

【关键词】：
【学位授予单位】：第四军医大学
【学位级别】：博士
【学位授予年份】：2013
【分类号】：R445.1;R73-36
【目录】：

下载全文 更多同类文献

CAJ全文下载

(如何获取全文？ 欢迎：购买知网充值卡、在线充值、在线咨询)

CAJViewer阅读器支持CAJ、PDF文件格式

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 沈杰;马爱英;刘秋如;丁威;王亚进;;经皮微波凝固综合治疗转移性肝癌[J];东南国防医药;2008年01期

2 李晓东;超声波空化效应的生物学机制[J];临床超声医学杂志;2004年01期

3 秦日昇;长春瑞滨的血液毒性特点及临床意义[J];临床肿瘤学杂志;2005年03期

4 马胜林;肿瘤热化疗的研究进展[J];现代实用医学;2004年05期

5 方东林;张庆;高山;;微波组织凝固联合全身化疗治疗结直肠癌肝转移17例分析[J];中华肿瘤防治杂志;2007年09期

6 唐东军;马秀丽;张丽华;;微波热疗联合化疗治疗晚期非小细胞肺癌的临床观察[J];中华肿瘤防治杂志;2009年19期

7 赵君;王升志;毛祖彝;;纳米磁性热敏脂质体在肿瘤热化疗中的应用研究[J];肿瘤预防与治疗;2008年01期

8 杨雯姝;邱利焱;金一;陈大为;;RP-HPLC法测定脂质体中重酒石酸长春瑞滨的含量[J];药物分析杂志;2006年05期

9 罗文;周晓东;巩萧音;郭晓辉;贺建国;秦海英;王莉;;HIFU消融后兔肝细胞凋亡与增殖的研究[J];中国超声医学杂志;2007年04期

10 郭晓辉;周晓东;任小龙;王文勇;罗文;何光彬;张苗苗;;高强度聚焦超声治疗对乳腺癌肿瘤细胞凋亡和增殖细胞核抗原的影响研究[J];中国超声医学杂志;2007年07期

【共引文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 姚春梅;尹刘;况成国;罗莉;;微波联合腹腔热灌注化疗治疗晚期腹盆腔恶性肿瘤临床分析[J];蚌埠医学院学报;2008年04期

2 刘云,陈海涛;表面活性剂在抗癌药制剂中的应用[J];日用化学工业;2003年04期

3 郑科;王洪林;;肝癌的射频消融联合治疗研究进展[J];重庆医学;2006年20期

4 何承峻;刘长安;肖林糠;;靶向纳米级脂质超声微泡在肿瘤治疗领域的研究进展[J];重庆医学;2012年16期

5 吴海江;高歌军;崔宁;;胆道支架置入联合内外放疗治疗恶性阻塞性黄疸的临床研究[J];当代医学;2010年17期

6 高天俊;许美丽;娄明武;王徽;范义;;巴曲酶灌注联合TACE/TAI抑制肿瘤生长和转移的初步研究[J];当代医学;2011年30期

7 兰红艳;孟兆雪;;综合治疗巨块型肝癌患者的护理[J];东南国防医药;2008年06期

8 徐永茂;徐冬云;张南征;史跃;栾智勇;;肝动脉栓塞化疗联合冷循环微波凝固治疗大肝癌40例[J];东南国防医药;2011年05期

9 官泳松;胡颖;贺庆;;化疗栓塞前后用多层螺旋CT评价肝癌血供[J];放射学实践;2007年08期

10 ;药物分析[J];分析试验室;2000年02期

中国重要会议论文全文数据库 前3条

1 郑元义;王志刚;冉海涛;张群霞;李晓东;凌智瑜;卢岷;任红;;诊断超声加微泡造影剂对新生血管的作用[A];全国医学影像技术学术会议（CMIT-2004）论文汇编[C];2004年

2 胡凤山;张青;王笑民;杨国旺;孙书贤;杨丽娟;;热疗联合胸腔内灌注顺铂治疗恶性胸腔积液的疗效观察[A];2009年首届全国中西医肿瘤博士及中青年医师论坛论文集[C];2009年

3 钟世根;王志刚;凌智瑜;殷跃辉;骆杰;李巧;张辉;董虹美;;超声辐照微泡促进犬骨髓间充质干细胞归巢到心肌缺血部位的实验研究[A];中国超声医学工程学会第十一届全国超声医学学术大会论文汇编[C];2012年

中国博士学位论文全文数据库 前10条

1 蔡文科;肝门部胆管癌危险、预后因素分析及不同术式对其之疗效研究[D];第二军医大学;2011年

2 冯强;半乳糖脂质体阿霉素门脉灌注治疗胃肠癌肝转移的实验研究[D];北京协和医学院;2011年

3 张婵;叶酸靶向羟基丁酸与羟基辛酸共聚物载药纳米粒缓释给药系统的研究[D];山西大学;2011年

4 程龙;携带tPA真核表达载体PLGA纳米粒-超声微泡复合体的构建及体外实验研究[D];华中科技大学;2012年

5 林亲录;Liposomes和micelles结构对天然抗氧化剂稳定性的影响[D];湖南农业大学;2002年

6 修建成;微泡空化对大鼠微血管组织结构的影响及其意义[D];第一军医大学;2004年

7 董兰凤;附子多糖、rhIL-2与阿霉素不同靶向制剂靶向治疗肿瘤的协同作用研究[D];河北医科大学;2004年

8 刘平;经颅脑超声造影对血脑屏障通透性的影响及机理研究[D];第三军医大学;2006年

9 张萍;超声介导脂质体微泡对大鼠血管平滑肌细胞生物学行为影响的研究[D];第三军医大学;2005年

10 郭冬平;超声/微泡法介导外源性基因在细胞系和动物体内定向性表达的研究[D];南京医科大学;2006年

中国硕士学位论文全文数据库 前10条

1 李玲;联吡啶钌脂质体的合成及其在电化学发光免疫分析中的应用[D];安徽师范大学;2010年

2 曹银;携带基因微气泡超声造影剂的研究[D];华东理工大学;2011年

3 刘宝峰;盐酸阿霉素脂质体注射液有效性和安全性研究[D];山东大学;2010年

4 李黎;经皮射频消融和手术治疗小肝癌的疗效对比[D];广西医科大学;2011年

5 霍美俊;磁流体联合甲氨蝶呤用于乳腺癌磁感应热化疗[D];北京中医药大学;2011年

6 韩金柱;肝动脉化疗栓塞联合射频消融治疗肝癌疗效的观察[D];河北医科大学;2011年

7 王亚光;射频消融对兔肝VX2肿瘤射频靶区内不同区带细胞损伤的实验研究[D];安徽医科大学;2011年

8 王雁;非消融性高强度聚焦超声对兔肝VX_2移植瘤生物学和声学特性及荷瘤兔生存期的影响[D];重庆医科大学;2011年

9 钱滢;超声辐照微泡介导双自杀基因系统对裸鼠乳腺癌体内抑瘤作用的研究[D];中南大学;2011年

10 应立平;射频消融治疗复发性肝癌24例临床分析[D];浙江大学;2011年

【二级参考文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 马明,朱毅,张宇,张东生,唐祖明,张海黔,顾宁;四氧化三铁纳米粒子与癌细胞相互作用的初步研究[J];东南大学学报(自然科学版);2003年02期

2 南克俊,魏永长,李春丽,隋晨光,李毅,杨谨,陈玲,刘亚民;肝动脉插管栓塞化疗治疗转移性肝癌59例[J];第四军医大学学报;2002年07期

3 谢文彪,郑军,王汉群,姜德诵;一次性集中和分散多处微波凝固肝组织的后果[J];肝胆外科杂志;2000年02期

4 谢星辉,徐国兴;脂质体的现状和展望[J];国外医学.药学分册;1984年01期

5 胡永成;肿瘤局部热疗与免疫[J];国外医学(肿瘤学分册);1994年04期

6 梁新华,王升志,毛祖彝;热化疗对唇癌患者T淋巴细胞免疫功能的影响[J];四川大学学报(医学版);2004年02期

7 沈杰;马爱英;王海洁;王亚进;刘秋如;;经皮微波凝固联合肝动脉化疗栓塞治疗少血供型肝癌[J];中国临床医学;2007年02期

8 周茜菁,方青芳,裘友好,马胜林;顺铂胸腔灌注联合热疗治疗癌性胸水的临床观察[J];临床肿瘤学杂志;2000年02期

9 邹汉青;王水;林红军;张智弘;刘晓安;彭晓静;;活体兔肌肉组织微波固化后病理学变化的实验研究[J];中华肿瘤防治杂志;2006年07期

10 邵汛帆;莫志文;史建军;陈冬平;邓敬锋;郑乃莹;;微波腔内热疗联合放射治疗鼻咽癌原发灶的初步临床研究[J];中华肿瘤防治杂志;2006年13期

【相似文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 秦日昇;长春瑞滨的血液毒性特点及临床意义[J];临床肿瘤学杂志;2005年03期

2 罗凤玲,梁卓林,杨蕴,吴煌坚,梁海斯;长春瑞滨为主联合方案治疗中晚期非小细胞肺癌疗效观察[J];广州医药;2005年02期

3 赵小燕;冯英;;长春瑞滨化疗外渗后护理和预防的探讨[J];基层医学论坛;2010年06期

4 万莉;钱晓萍;刘宝瑞;胡静;朱丽晶;禹立霞;;长春瑞滨及联合热疗抗血管生成作用的实验[J];肿瘤防治研究;2011年10期

5 潘小杰,欧德彬,吴榕龙;长春瑞滨为主联合方案治疗39例中晚期非小细胞肺癌[J];中国癌症杂志;2002年02期

6 施险峰,徐皖湘,沈冶中,范爱华;长春瑞滨为主联合方案治疗36例中晚期非小细胞肺癌[J];河南肿瘤学杂志;2003年02期

7 朱其聪;罗荣城;缪景霞;李爱民;梁卫江;罗宇玲;戴明;;透明质酸酶、喜辽妥对长春瑞滨外渗性大鼠皮肤损伤的疗效[J];肿瘤;2007年06期

8 王敏杰;;纳米银抗菌凝胶治疗长春瑞滨外渗的效果[J];护理研究;2011年36期

9 王莉;马兰兰;;长春瑞滨外渗致局部皮肤坏死1例临床护理[J];齐鲁护理杂志;2012年01期

10 李俊波;杨金香;杨小丽;;紫外分光光度法测定长春瑞滨[J];长治医学院学报;2014年02期

中国重要会议论文全文数据库 前10条

1 陈于之;;1例长春瑞滨外周用药致局部严重灼伤的护理体会[A];中华护理学会全国肿瘤护理学术交流暨专题讲座会议论文汇编[C];2009年

2 方小玲;左凤霞;;长春瑞滨渗漏所致静脉炎的预防及护理[A];“河南省肿瘤专科护士职业安全防护及新技术交流”学术会论文集[C];2011年

3 张玮;钱晓萍;刘宝瑞;;长春瑞滨靶向药物投递系统的研究进展[A];2013医学前沿论坛暨第十三届全国肿瘤药理与化疗学术会议论文集[C];2013年

4 鲁汉英;陈姣姣;闻曲;谢爱芹;邓秀芝;马玲玉;陈莎;唐晓菁;朱长娥;;长春瑞滨输注前后干预疗法对静脉炎发生率影响的临床研究[A];全国肿瘤护理学术交流暨专题讲座会议论文汇编[C];2006年

5 段改芹;刘晓娥;胡广杰;刘春林;;两种预防长春瑞滨致静脉炎方法的观察[A];河南省肿瘤全科护理学术交流会议资料汇编[C];2005年

6 胡婷婷;;长春瑞滨联合顺铂治疗非小细胞肺癌的护理[A];全国肿瘤护理学术交流暨专题讲座会议论文汇编[C];2007年

7 张瑾;;长春瑞滨联合化疗治疗急性淋巴细胞白血病临床观察[A];中华医学会第八次全国血液学学术会议论文汇编[C];2004年

8 张瑾;;长春瑞滨联合化疗治疗急性淋巴细胞白血病临床观察[A];中华医学会第八次全国血液学学术会议论文汇编[C];2004年

9 李娜;;输注长春瑞滨致静脉反应的影响因素、预防与护理[A];全国静脉治疗护理学术交流暨专题讲座会议论文汇编[C];2006年

10 江宾;谭小辉;曾定芬;廖佳;张丽平;;冰敷及牛黄解毒丸膏预防长春瑞滨所致静脉炎的疗效及探讨[A];第四届中国肿瘤学术大会暨第五届海峡两岸肿瘤学术会议论文集[C];2006年

中国重要报纸全文数据库 前2条

1 余自成;[N];医药经济报;2006年

2 黄海波;[N];中国知识产权报;2011年

中国博士学位论文全文数据库 前2条

1 程铁峰;长春瑞滨纳米胶束药代动力学研究[D];河南大学;2009年

2 李卓;热消融及超声介导长春瑞滨长循环热敏脂质体靶向释放增强治疗兔VX2肿瘤的实验研究[D];第四军医大学;2013年

中国硕士学位论文全文数据库 前10条

1 李新;中药联合长春瑞滨治疗老年ⅢB/Ⅳ期非小细胞肺癌的临床研究[D];广州中医药大学;2007年

2 杨利杰;长春瑞滨对体外培养食管癌细胞增殖及凋亡的影响[D];大理学院;2014年

3 饶创宙;三维适形放疗联合长春瑞滨加顺铂同步化疗治疗Ⅲ期非小细胞肺癌的临床研究[D];浙江大学;2009年

4 熊茵;长春瑞滨（Vinorelbine）合成过程化合物监测方法研究[D];华中科技大学;2007年

5 刘珊;sCD40L联合长春瑞滨对肺腺癌A549细胞的作用[D];南京医科大学;2010年

6 张妍;rh-Apo2L联合长春瑞滨诱导人肺鳞癌细胞凋亡及相关机制的实验研究[D];福建医科大学;2014年

7 胡领军;长春瑞滨衍生物的设计、合成和抗肿瘤构效关系研究[D];浙江工业大学;2013年

8 徐俊萍;大豆异黄酮联合长春瑞滨对兔VX2肿瘤模型影响的实验研究[D];延边大学;2007年

9 颜科;长春瑞滨脂质体的制备及鼻咽癌HNE-1细胞株药物浓度研究[D];重庆医科大学;2009年

10 秦雁;长春瑞滨脂质体对人喉癌耐药细胞株Hep-2/ADR耐药逆转作用研究[D];重庆医科大学;2013年

  本文关键词：热消融及超声介导长春瑞滨长循环热敏脂质体靶向释放增强治疗兔VX2肿瘤的实验研究，由笔耕文化传播整理发布。

本文编号：137958