Survivin抑制剂YM155对乳腺癌细胞MDA-MB-231凋亡及自噬影响的探讨

发布时间：2017-06-27 08:01

  本文关键词：Survivin抑制剂YM155对乳腺癌细胞MDA-MB-231凋亡及自噬影响的探讨，，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的：研究生存素(survivin)抑制剂YM155对三阴性乳腺细胞株MDA-MB-231的凋亡效应及其可能的作用机制。方法：采用CCK-8法实验检测不同浓度YM155对MDA-MB-231细胞增殖的影响,计算其24、48 h半数抑制浓度(the half maximal inhibitory concentration,IC50);流式细胞仪检测细胞凋亡情况；RT-PCR法检测各加药组与对照组间细胞的survivin和bcl-2的mRNA的表达量；蛋白质印迹法检测survivin、bcl-2、caspase-3、 PARP蛋白表达变化情况。结果：YM155对MDA-MB-231具有明显的生长抑制效应且呈剂量和时间依赖性。流式细胞仪检测显示YM155在0.5、1.0、1.5 ng/ml浓度对细胞的凋亡率分别是11.9±2.4%、21.7±2.6%、30.8±4.5%,与对照组(6.4±1.2%)相比具有统计学意义(P0.01)。当使用自噬抑制剂3-MA(5mM)联合处理细胞24h后细胞增殖率(62.5±±3.3%),与单用YM155组(54.7±2.7%)相比,细胞增殖活性增强(P0.05)。YM155可显著下调surviivn的mRNA和蛋白表达,降低bcl-2和提高活化caspase-3、PARP的蛋白表达,同时上调beclin 1表达及增加LC-3Ⅱ/ LC-3Ⅰ的比值,促进了细胞自噬的发生。结论：YM155能够有效诱导乳腺癌细胞MDA-MB-231凋亡及自噬的发生,其诱导的自噬效应进一步促进其凋亡的发生。
【关键词】：YM155 三阴性乳腺癌 生存素 凋亡 自噬
【学位授予单位】：南京医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R737.9
【目录】：

• 中文摘要5-6
• Abstract6-7
• 前言7-13
• 参考文献10-13
• 材料与方法13-25
• 1. 实验材料13-15
• 1.1. 细胞株13
• 1.2. 主要试剂和耗材13-14
• 1.3. 主要仪器与设备14-15
• 2. 实验方法15-25
• 2.1. 细胞培养15-16
• 2.2. CCK-8法检测细胞增殖16-17
• 2.3. Annexin检测药物作用前后的细胞凋亡率17
• 2.4. Western Blotting检测蛋白表达17-22
• 2.5. Real time PCR法检测基因表达22-24
• 2.6. 数据统计分析24-25
• 结果25-34
• 1. YM155抑制MDA-MB-231的增殖25-26
• 2. YM155促进MDA-MB-231细胞凋亡26-28
• 3. 自噬影响了YM155抑制MDA-MB-231的增殖作用28-29
• 4. 自噬影响了YM155对MDA-MB-231的凋亡作用29-30
• 5. YM155对各基因mRNA表达的影响30-31
• 6. YM155对各蛋白表达的影响31-34
• 讨论34-38
• 结论38-39
• 参考文献39-43
• 综述43-54
• 参考文献50-54
• 中英文缩写54-55
• xO究生期间发表的论文55-56
• 致谢56

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本文编号：488991